Reacciones de identificacion de proteinas.

...

Experimento #2.

Reacción Xantoproteíca.

- Preparar los tubos de ensaye como se muestra en la tabla 2 “Serie de tubos reacción Xantoproteíca” de manera cautelosa, marcando cada uno de los tubos, según corresponda con su contenido.

- Una vez que los tubos estén preparados e identificados, caliéntelos calentar a baño de agua a ebullición durante 5 minutos.

- Dejar que se enfrié durante 10 minutos.

- Agregar por estratificación y sin mezclar 0.5 ml de Hidróxido de amonio a todos los tubos.

- Observar los resultados y registre los cambios ocurridos. La formación de un anillo en la interface es positivo. Reportar con un signo positivo los tubos donde se haya formado el color naranja-rojizo.

Tabla 2. Serie de tubos reacción Xantoproteíca

Reactivos

Tubo #1

Blanco

Tubo #2

Tubo #3

Tubo #4

Tubo #5

Agua

1.0 ml

Albúmina

1.0 ml

Peptona

1.0 ml

Gelatina

1.0 ml

Tirosina

1.0 ml

HNO3

1.0 ml

1.0 ml

1.0 ml

1.0 ml

1.0 ml

Resultados:

Tubo y reactivo

Resultados

Tubo #1 Blanco agua

(-)

Tubo #2 Albumina

(++)

Tubo #3 Peptona

(+)

Tubo #4 Gelatina

(+)

Tubo #5 Tirosina

(-)

Tabla 1. Serie de tubos reacción Biuret

Tubo y reactivo

Resultados

Tubo #1 Blanco agua

(-)

Tubo #2 Albumina

(+)

Tubo #3 Peptona

(+)

Tubo #4 Gelatina

(-)

Tubo #5 Tirosina

(+)

Tabla 2. Serie de tubos reacción Xantoproteica

[pic 2]

Figura 1. Reacción de Biuret

[pic 3]

Figura 2. Reacción de Xantoproteica

Discusión:

La intensidad del color es proporcional a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del método es muy poca por lo cual solo es útil para la cuantificación de proteínas en altas concentraciones.

La xantoproteica es una prueba que se caracteriza a los aminoácidos aromáticos. La tirosina es como la fenilalanina pero con un grupo hidroxilo en su anillo aromatico lo cual lo hace menos reactivo. Esta prueba se produce la nitración del anillo bencénico mediante la reacción con el ácido nítrico puro los cuales causan la coloración amarilla a la mezcla resultante.

Conclusión:

Las proteínas constituyen una de las moléculas más importantes del organismo ya que cuentan con múltiples funciones como el metabolismo, hormonal, defensiva, transporte, la elasticidad y resistencia a órganos y tejidos, entre muchas otras más es por eso que tiene que tener un conocimiento sobre ella, el cómo es posible identificar cada una ya que todas las proteínas son similares químicamente puesto que todas están constituidas de unidades de cadenas largas de aminoácidos y por medio del reacción de biuret el cual detecta la presencia de proteínas y otros compuestos en sustancias desconocidas y en el caso de la reacción Xantoproteica se da la detección de la proteína es por el color amarillo que tiene la sustancia que nos da a entender que contiene aminoácidos con grupos bencénicos.

Cuestionario:

- ¿Cuál es el fundamento de la reacción de Biuret?

La reacción tiene como propósito la identificación de proteínas a través de la reacción que producen los péptidos y las proteínas pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse el aminoácido, la forma en que se presenta es dando un pigmentación en la sustancia color violeta cuya intensidad del color depende de la concentración de proteínas.

Referencias bibliográficas:

- Murray R. K., Bender D. A., Botham K. A., Kenelly P. J., Rodwell V. W., Weil P. A. 2009. Estructura y funciones de proteínas y enzimas. Harper. Bioquímica. McGraw Hill. 28ª edición. México. 27-29

- Nelson L., Cox M. 2005. Aminoácidos, péptidos y proteínas. Principios de bioquímica Lehninger. Omega. 4ta edición. Barcelona. 85-87

- Stryer L., Berg J. M., Tymoczko J. L. 2002. Explorando las proteínas. Bioquímica. W. H. Freeman. 5ª edición. Estados Unidos. 138-141.

- Zagoya J., Juárez M. C. 2007.