Practica 7: Reacciones de Identificacion de Carbohidratos

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de la reacción con fenilhidrazina.

Carbohidrato

Osazona obtenida

Imagen de muestra

Manosa

Dibujo

Del libro

Glucosa

Dibujo

Del libro

Xilosa

Dibujo

Del libro

Ribosa

Dibujo

Del libro

Fructosa

Dibujo

Del libro

Análisis de Resultados:

Hidrólisis: Los disacáridos y los polisacáridos experimentan reacciones de hidrólisis. Los disacáridos como la sacarosa se hidrolizan en medio ácido con la enzima sacarasa o invertasa convirtiéndose en alfa-D-glucosa y beta-D-fructosa. La hidrólisis del almidón se efectúa por medios ácidos o por enzimas del tipo amilasa que se encuentran tanto en las plantas como en los animales. La beta-amilasa, actúa sobre la molécula de almidón pero se detiene en las ramificaciones de la amilopectina y deja sin atacar el 30 a 40% del almidón (dextrina limite). Las alfa-amilasas atacan uniones centrales e hidrolizan el almidón en fragmentos de seis a siete unidades. Para obtener la hidrólisis más completa de la amilopectina es necesaria otra enzima, la amilo-1,6-glucosidasa que fragmenta la molécula a nivel de la ramificación. Las amilasa más importantes para el hombre son la amilasa de la saliva y del jugo pancreático. La hidrólisis ácida del glucógeno libera glucosa cuantitativamente. El glucógeno también es atacado por la beta-amilasa y forma dextrinas límite y maltosa; para lograr la degradación enzimática completa también se necesita la amilo-1,6-glucosidasa. Los ácidos fuertes como el HCl y el H2SO4 , concentrados hidrolizan a los polisacáridos hasta monosacáridos y sobre estos últimos actúan deshidratándolos.

Reacción de Molish: Todos los carbohidratos tanto los monosacáridos como los disacáridos y polisacáridos reaccionan con alfa-naftol, en presencia de ácido sulfúrico para formar sustancias complejas coloreadas. Todos los glúcidos por acción del ácido sulfúrico concentrado se deshidratan formando compuestos furfúricos (las pentosas dan furfural y las hexosas dan hidroximetilfurfural). Estos furfurales se condensan con el reactivo de Molish (solución alcohólica de alfa-naftol), dando un producto violeta. Esta reacción se utiliza para la identificación en general de los carbohidratos. El proceso se fundamenta en la deshidratación que experimentan los carbohidratos en presencia de ácidos fuertes, como el ácido sulfúrico (H2SO4) concentrado, el cual causa hidrólisis de los enlaces glucosídicos del disacárido o polisacárido presente. Después de deshidratado el carbohidrato se forma el complejo coloreado, porque el grupo carbonilo, del carbohidrato, se polariza produciendo un carbocatiòn que se estabiliza con los pares electrónicos libres del oxígeno del alfa -naftol. La aparición de un anillo de rojo violeta es indicativo de la presencia de carbohidratos en la muestra.

Descripción de la reacción.

Prueba de Lugol: permite distinguir Almidón, Glucógeno, Dextrinas y otros polisacáridos. reactivo de Lugol, el cual está constituido de yodo disuelto en yoduro de potasio, lo cual hace que se forme un complejo físico de iones triyoduro (I3-), los cuales se sitúan dentro de los espacios helicoidales que presenta la Amilosa o la Amilopectina (almidón).

Prueba de Fehling:

Se basa en el carácter reductor de los monosacáridos. Si el glúcido que se investiga es reductor, se oxidará dando lugar a la reducción del sulfato de cobre (II), de color azul, a óxido de cobre (I), de color rojo-anaranjado.

los reactivos de Fehling, Tollons y Benedict, son agentes oxidantes moderados, oxidando a los grupos aldehídos al mismo tiempo que estos se reducen. Reactivo de Fehling, el cual consiste de dos partes: una parte está constituida por una solución de Sulfato Cúprico, y la otra por Hidróxido de sodio y Tartrato de Sodio Potasio (Sal de Rochelle). Al mezclar cantidades iguales de estas dos soluciones, se forma un complejo soluble de Tartrato Cúprico, de color oscuro, el cual proporciona una pequeña concentración de iones Cúprico. La presencia de carbohidratos reductores queda evidenciada, ya que el grupo aldehído reduce la solución de Fehling y forman un precipitado rojo ladrillo de Óxido Cuproso.

El Hidróxido de Sodio y el Tartrato que contiene el reactivo de Fehling, son empleados, ya que actúan como agentes quelantes, para que el ion cuproso no se precipite como Hidróxido Cúprico e interfiera con la reacción.

El Tartrato no puede formar complejos con el ión cuproso, de manera que la reducción del ion cuproso a cúprico, al reaccionar con los carbohidratos, provoca la formación de un precipitado rojo ladrillo, proveniente del óxido cuproso, cuando la reacción es positiva.

Reacción de Bial: Al reaccionar con aldopentosa el ácido clorhídrico, pierde moléculas de agua, y produce la sustancia conocida con el nombre de furfural. El furfural puede reaccionar en medio ácido con el orcinol. Si en esas condiciones se agrega una pequeña cantidad de cloruro férrico, se formará un complejo de color verde azulado.

Formación de osazonas: Las aldosas y las cetosas al poseer un grupo aldehído y cetona respectivamente pueden reaccionar con la fenilhidrazina para formar fenilhidrazonas, si se utiliza un exceso de fenilhidrazina se forma una osazona que contiene dos residuos de fenilhidrazina por molécula, mientras que una tercera molécula del reactivo se convierte en anilina y amoniaco.

Conclusiones:

Se logró demostrar los diferentes carbohidratos presentes en cada muestra, estudiada, se está manera, se logró demostrar que cada carbohidrato posee distintas propiedades de acuerdo a su estructura, gracias a estas diferencias que presenta, reacciona de una manera distinta, como se demostró en la prueba de Bial, la cual aunque es una prueba para identificar pentosas, igualmente presentó una coloración, la cual demostraba un color