Análisis Químico Clínicos UROANÁLISIS

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Dado que el pH es recíproco a la concentración de los iones hidrógeno, a medida que aumentan los iones de H+, el pH aumenta o se torna mas acido. Cuando disminuye la concentración de H+; el pH aumentara o se torna mas alcalino.

Todas las marcas de tiras reactivas utilizan los mismos indicadores, rojo de metilo y azul de bromotimol, y miden un rango de pH entre 5.0 y 8.5.

Proteínas

La presencia de mayor cantidad de proteínas en la orina puede ser un indicador importante de enfermedad renal.

En un riñón normal, solamente se filtra en el glomérulo una pequeña cantidad de proteínas de bajo peso molecular. La estructura de la membrana glomerular evita el pasaje de las proteínas de alto peso molecular incluida la albumina. En un riñón, la excreción normal es menor a 100 mg/m2/24h.

El método de colorimetría utilizado en las tiras reactivas se basa en el concepto conocido como los errores proteicos de los indicadores, fenómeno que significa que el punto de cambio de color de algunos indicadores del pH es diferente en presencia de proteínas de lo que se observa en ausencia de proteína, debido a que las proteínas actúan como iones hidrogeno aceptores en un pH constante. Ususalmente, el indicador cambia de amarillo a azul entre el pH 3 y el pH 4, pero ante la presencia de proteínas, este cambio de color se producirá entre el pH 2 y el pH 3. Por lo tanto en la presencia de proteínas se produce un “error” en el comportamiento del indicador.

Glucosa

La presencia de cantidades significativas de glucosa en la orina se denomina glcosuria. La cantidad de glucosa que aparece en la orina depende del nivel de glucosa en sangre, el índice de filtración glomerular y del grado de reabsorción tubular. Usualmente, la glucosa no estará presente en la orina hasta que los niveles en sangre excedan los 160-180 mg/dL, que es el umbral renal normal para la glucosa.

Las tiras reactivas impregnadas de la enzima glucosa oxidasa detectan solamente glucosa. Estas tiras utilizan la siguiente reacción enzimática secuencial doble:

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Cetonas

Los cuerpos cetónicos se forman cuando el aporte de ácidos grasos al hígado supera su capacidad de utilización del Acetil-CoA. Se vierten entonces a sangre desde donde son captados por órganos aeróbicos para su oxidación y obtención de energía. La acetona se elimina por el aliento, mientras que el acetoacetato y el β-hidroxibutirato lo hacen por orina.

Su eliminación sólo ocurre en cantidades apreciables cuando su síntesis es desmedida, como ocurre en la diabetes mellitus descompensada, en el ayuno prolongado y procesos febriles. En estos casos se detecta cetonemia (presencia en sangre en cantidades elevadas) y cetonuria (presencia en orina).

Sólo el acetoacetato y la acetona reaccionan con nitroprusiato de sodio y glicina en medio alcalino dando un complejo de color violeta. El β-hidroxibutirato no reacciona.

Sangre oculta.

Aquellas pruebas que evalúan la sangre oculta detectaran la hematuria (presencia de sangre o RBC intactos en orina), la hemoglobinuria (presencia de hemoglobina libre en orina) y la mioglobinuria (presencia de proteína hem del musculo estriado).

Estos pueden coexistir. Si la correlacion entre los resultados microscópicos y los químicos no implican hematuria, se debn efectuas evaluaciones y estudios adicionales para diferenciar entr hemoglobinuria y mioglobinuria. La prueba para diferenciar estos dos es la electroforesis.

El procedimiento de las tiras reactivas se basa es la actividad seudoperoxidasa de la hemoglobina y mioglobina que cataliza la oxidación de un cromógeno mediante un peróxido orgánico.

Bilirrubina

La bilirrubina se forma a partir de la degradación de la hemoglobina en el sistema reticuloendotelial. Luego se une a la albumina y es transportada a través de la sangre havia el hígado. Normalmente en la orina no se puede hallar ninguna cantidad detectable de bilirrubina.

Muchas tiras reactivas se basan en la reacción de acoplamiento de una sal de diazonio con la bilirrubina en un medio acido según esta reacción:

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Los resultados de la bilirrubina se leen entre 30 y 60 segundos, y muestran un rango de colores que va desde el amarillo pálido pasando por varios tonos de tostado a violeta.

Urobilinogeno

En los intestinos, las enzimas bacterianas convierten la bilirrubina en varios compuestos relacionados a los que se les denomina urobilinogeno. La mayoría del urobilinogeno y sus variables se pierde en la heces. Alrededor del 10 – 15 % se reabsorbe en el torrente sanguíneo, regresa al hígado y se vuelve a excretar en los intestinos. Una pequeña cantidad de estos compuestos también se excreta en la orina a través de los riñones, en un nivel normal de aproximadamente 1-4 mg/h.

Las pruebas para el urobilinogeno están basadas en la reacción del aldehído de Ehrlich:

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Nitritos

La prueba del nitrito es un método indirecto y rápido para la detección temprana de la bacteriuria asintomática y significativa. Los organismos comunes que pueden causar infecciones urinarias, como Escherichia coli y especies de Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella y Proteus, producen enzimas que reducen el nitrato urinario a nitrito

Las tiras reactivas para la detección del nitrito en la orina que utilizan habitualmete el ácido p-arsanílico y un compuesto de quinolina. El nitrito reacciona con el ácido p-arsanílico para formar un compuesto de diazonio. Este compuesto luego se acopla con el compuesto de quinolina y produce el color rosado.

Leucocitos.

Los leucocitos pueden estar presentes en cualquier fluido corporal dependiendo de una causa para su presencia. Los leucocitos que se muestran normalmente en una muestra de orina son los neutrofilos, que normalmente están presentes en cantidades bajas.

Los neutrofilos contienen enzimas que se conocen con el nombre de esterasas. Estas esterasas pueden detectarse mediante tiras reactivas que contengan un sustrato apropiado como el éster del