BIOTECNOLOGIA Trabajo Colaborativo Fase Individual

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Métodos Directos

- Cuenta total microscópica (Cámara de Neubauer, de Petroff)

- Cuenta viable (Vaciado en placa, Extensión con varilla de vidrio, Cuenta en tubo de Hungate, Tinción con azul de tripano)

- Medición lineal o radial

Métodos Indirectos

- Número más Probable (NMP)

- Turbidimetría

- Nefelometría

1.5 Cuál es la aplicación industrial de conocer la curva de crecimiento de un microorganismo?

Es muy importante porque muchas empresas que producen microorganismo a escala industrial, le es necesario conocer la curva de crecimiento del microorganismo, para saber en sí, su comportamiento de su crecimiento y de esta manera manipular las condiciones para la obtención del producto deseado, como por ejemplo: para producción de metabolitos primarios se debe alargar la fase logarítmica, si son metabolitos secundarios se les alarga la fase estacionaria y para aumentar la cantidad de biomasa, se buscan las condiciones de mayor producción de células.

Encontramos que en muchas fermentaciones el compuesto de interés se desarrolla en la fase exponencial, en esta fase se puede mantener la población estable por periodos prolongados de tiempos.

Encontramos cultivos en lotes: Es un sistema cerrado, solo se le adiciona oxígeno, antiespumantes y bases o ácidos para el control del Ph, este cultivo se maneja por un periodo de tiempo, con variación de la composición química, la composición de biomasa y la de metabolitos. Se hace la recuperación del producto con la interrupción del proceso. Para este tipo de cultivos es necesario alargar la fase logarítmica y la fase estacionaria.

Encontramos el cultivo continuo: Para que el cultivo continuo sea efectivo es necesario que el proceso se encuentre en estado estacionario, este se puede mantener así siempre y cuando cumpla con condiciones inocuas durante su funcionamiento.

Este sistema se ha utilizado para la fabricación de productos como la cerveza y el etanol y para el tratamiento de las aguas residuales.

1.6 Que entiendo por Absorbancia?

Es la cantidad de intensidad de luz que absorbe una muestra. Es muy importante tener en cuenta que la absorbancia de una solución es directamente proporcional a su concentración.

1.7 Por qué es necesario utilizar una solución blanco cada vez que se hace una nueva lectura en el espectrofotómetro?

La solución blanco es aquella que tiene todos los reactivos y en la misma concentración de la que tiene la muestra, pero sin contener el elemento que se está determinando. Se utiliza para colocar en "cero" de absorbancia el espectrofotómetro.

1.8 Que es lo que mide realmente el espectrofotómetro y como se relaciona con las fases de crecimiento microbiano?

Un espectrofotómetro o colorímetro hace uso de la transmisión de la luz a través de una solución para determinar la concentración de un soluto dentro de la solución. Un espectrofotómetro difiere de un colorímetro en la manera en la cual la luz es separada en sus longitudes de onda componentes. Un espectrofotómetro usa un prisma y un colorímetro utiliza filtros. Ambos se basan en un diseño simple en el cual la luz de una determinada longitud de onda pasa a través de una muestra y se mide la cantidad de luz que es transmitida. Esto es realizado colocando una fotocelda del otro lado de la muestra. Todas las moléculas absorben energía radiante en una longitud de onda u otra. Esas que absorben energía dentro del espectro visible son conocidas como pigmentos. Las proteínas y los ácidos nucleicos absorben luz en el rango ultravioleta.[3]

2. De acuerdo al capítulo de crecimiento microbiano, del módulo. Cuál es la diferencia entre la constante de la velocidad de crecimiento (k) de un organismo y su tiempo de generación (g).

Tiempo de generación (G)

Es el tiempo requerido para que una célula se divida o una población se duplique.

G = t/n

Si partimos de una célula al cabo de una generación habrá duplicado su número y así sucesivamente en cada generación.

El valor del tiempo de generación (g) depende de: composición del medio, temperatura, pH, osmolaridad (tonicidad), etc.

Los microorganismos heterótrofos suelen crecer más rápidamente en los medios complejos, ricos, que en los medios sintéticos, y dentro de estos últimos, mejor con glucosa que con otras fuentes de carbono. Algunos microorganismos tienen, a su temperatura óptima tiempos de generación muy cortos (15, 20 min), mientras que otros tienen crecen más lentamente, con tiempos de generación que pueden ser de varias horas o incluso días.

Si partimos de N células (en microbiología los estudios se realizan conpoblaciones), a un tiempo determinado (Ta) tenemos un número de células determinadas (Na).

En la primera generación se duplicará el número de células (2Na) y así sucesivamente de tal manera que al cabo de un tiempo determinado Tb el número de células determinadas será Nb (Nb= 2n Na) donde n es el número degeneraciones transcurridas desde Ta hasta Tb En esta fórmula (Nb = 2n Na) conocemos todos los parámetros excepto el número n de generaciones transcurridas por lo que aplicando logaritmos será posible calcularlo. Una vez obtenido el número de generaciones n transcurridas en un tiempo t podremos calcular el tiempo de generación G para ese microorganismo

Diferencia personal

La constante de velocidad es la concentración de nutrientes y medio requeridas para el crecimiento del microorganismo en el medio de cultivo. Y el tiempo de generación es el tiempo que requiere una célula para dividirse o reproducirse para que esto suceda requiere que el medio o la siembra tengan unas propiedades de PH, Temperatura, osmolaridad, pues así podrá crecer fácilmente por lo tanto se adapta al medio en que se encuentra.

Constante de la velocidad de crecimiento (k)

La velocidad de crecimiento puede mantenerse constantes, puesto que la velocidad de crecimiento es una función de