El principio de la técnica se basa en la PCR
Enviado por Helena • 12 de Abril de 2018 • 1.783 Palabras (8 Páginas) • 386 Visitas
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química.
La calidad del ADN, con respecto tanto al nivel de la degradación del ADN y de la
nivel de inhibición. Esta métrica es útil para determinar si los loci STR con mayor
tamaños de amplificación es probable que se recuperaron en el perfil de STR.
muestras muy degradadas que no pueden ser recuperados por STR pueden ser analizados con
Los paneles de HID-Ion AmpliSeq ™ y el sistema del personal Ion Genome® (PGM ™) (véase
"Los estudios de muestras degradadas: Kit GlobalFiler® STR y HID-Ion AmpliSeq ™
Identidad y linaje Panel "en la página 105).
• Si inhibidores de la PCR se encuentran presentes en una muestra que puede requerir purificación adicional
antes de proceder a análisis de STR.
El Quantifiler® HP y Trío Cuantificación de ADN utilizan kits de varias copias meta loci
para mejorar la sensibilidad de detección. La meta loci humanos específicos (Pequeño autosómica,
Grandes autosómicos y el cromosoma Y-metas) constan cada uno de múltiples copias
dispersado en varios cromosomas autosómicos (Small y Large autosómica
Autosómica), o múltiples copias en el cromosoma.
Para maximizar la consistencia de los resultados de cuantificación, se seleccionaron objetivos genómicos
con los sitios de cebador y la unión a la sonda conservados dentro de los genomas individuales y también
con una mínima variabilidad del número de copias entre los diferentes individuos y de la población
grupos. Como resultado, la sensibilidad de detección de los ensayos Quantifiler® HP y Trio es
mejorado en Quantifiler® Duo, humano, humano e Y Cuantificación de ADN masculino ensayos de kit. Los objetivos de cuantificación primaria (Pequeño autosómicos e Y) consisten en amplicones relativamente cortos (75 a 80 bases) para mejorar la detección de ADN degradado muestras. Además, los kits Quantifiler® HP y Trio contienen cada uno una gran objetivo autosómica con un amplicón largo (> 200 bases) para ayudar en la determinación de si un ADN muestra se degrada. química de ensayo ha sido optimizado para la multiplexación más eficiente, más rápido ciclo de PCR tiempos (1 hora), y una mejor tolerancia al inhibidor. Las mejoras de rendimiento global permiten que los kits Quantifiler® HP y Trio para que coincida mejor será el rendimiento mejorado de kits STR nuevas que están diseñados para dar cabida a las muestras más difíciles, para ejemplo, el Identifiler® Plus, NGM Select ™ o el GlobalFiler ™ Amplificación por PCR Kits. (STR kits son para uso forense o paternidad Sólo).
Quantifiler® HP kit de cuantificación de ADN contiene todos los reactivos necesarios para la
la amplificación, detección y cuantificación de dos dianas de ADN específicos de los humanos.
Quantifiler® Trío kit de cuantificación de ADN contiene todos los reactivos necesarios para la
la amplificación, detección y cuantificación de dos dianas de ADN específicos de los humanos y una
diana de ADN específico masculino humano.
Los reactivos están diseñados y optimizados para el uso con el Biosystems® Applied 7500
Sistema de PCR en tiempo real para la identificación humana, que incluye:
HID en tiempo real del software de análisis de PCR v1.2- Diseñado específicamente para ayudar
laboratorios de identificación humana que realizan la cuantificación de ADN, mediante la simplificación
preparación de las pruebas, la racionalización de la revisión de datos, la dilución y la configuración de la reacción de
STR análisis de aguas abajo.
• Instrumento 7500 --PCR en tiempo real instrumento. Para obtener más información, consulte "7500
Real-Time PCR System de Identificación Humana "en la página 97.
Los objetivos del ensayo Quantifiler® HP y Trio sirven las siguientes funciones en el
sistema multiplex:
• Pequeño autosómica (SA) Objetivo: El objetivo SA es el objetivo principal de cuantificación
para el ADN genómico humano total. Su tamaño de amplificación más pequeño (80 pb) se alinea con
los tamaños de típica "mini" loci STR y hace que sea más capaz de detectar degradada
muestras de ADN.
• Gran autosómica (LA) Objetivo: El objetivo de LA se utiliza principalmente como un indicador de
la degradación del ADN, mediante la comparación de la relación de su resultado con el de cuantificación
el objetivo SA.
• Objetivo cromosoma Y (no presente en el ensayo Kit Quantifiler® HP): El objetivo Y
permite la cuantificación del componente de ADN genómico humano masculino de una muestra,
y es particularmente
os kits Quantifiler® HP y Trío Cuantificación de ADN contienen materiales suficientes para
400 realizar reacciones en un volumen de reacción de 20 l
actores de la degradación (cont.)
Acciones como almacenar la evidencia en cajuelas de vehículos, camionetas, escritorios de oficina, bajo la luz directa del sol, en refrigeradores
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