Hemostasia y Fibrinólisis

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La concentración plasmática de tPA medida como antígeno es muy baja ya que oscila entre los 5 y 10 μg/ml y presenta variaciones fisiológicas así como en condiciones patológicas. Asimismo, el tiempo de vida media del tPA libre es de 5 minutos, aproximadamente (Chmielewska et al., 1983). El proceso regulatorio del tPA activo en la circulación sanguínea es el siguiente: a) secreción del tPA de las células endoteliales, b)inhibición del tPA por el inhibidor tipo 1 del activador del plasminógeno (PAI-1) y c) eliminación por el hígado (Chandler et al., 1997, Chandler, 1996, Chandler et al., 1995, Wiman, 1998). La diferencia en el radio molar entre la concentración del antígeno de tPA y su actividad es típicamente explicado por la presencia de PAI-1, el cual forma un complejo inactivo con tPA (Kluft, 1994). Es posible que los complejos de tPA con PAI-1 u otros inhibidores de proteasas tengan un tiempo de vida mayor en circulación comparado con la proteína libre, permitiendo la acumulación de los complejos (Chandler et al., 1997).

Activador del plasminógeno tipo urocinasa

Un segundo activador endógeno del Pg es el uPA de cadena sencilla (sc-uPA) o prourocinasa, la cual tiene un peso molecular de 54 KDa y está formada por 411 aminoácidos. Posee un dominio tipo EGF , un dominio tipo “kringle” y la triada catalítica conformada por His204/Asp255/Ser356 (Kasai et al., 1985). La escisión llevada a cabo en el enlace peptídico de los residuos Lys158-Ile159 por l aplasmina y calicreína genera su forma bicatenaria unida por un puente disulfuro. El gen del uPA se localiza en el cromosoma 10q26, es codificado por 11 exones y es expresado en células endoteliales, macrófagos, células de epitelio renal y células tumorales (Holmes et al., 1985, Riccio et al., 1985). En la forma bicatenaria del uPA se distinguen dos cadenas, una pesada de 54 KDa y una ligera, de 33 KDa; además, ambas formas difieren por la presencia y ausencia respectívamente de un fragmento amino-terminal de 135 resíduos liberado por la escisión entre los residuos lys135 y Lys136 por la plasmina. Aunque ambas formas son capaces de activar al Pg, solo la cadena de elevado peso molecular se une al receptor del uPA (uPAR) (Hajjar, 2003). El uPA presenta menor afinidad a la fibrina comparado con el tPA, sin embargo, presenta efectividad en la activación del Pg en presencia o ausencia de fibrina (Gurewich et al., 1984, Lijnen et al., 1986). Su concentración en plasma es de 3.5 μg/L (Wijngaards et al., 1982).

Inhibidores de la fibrinólisis

La acción de la plasmina es modulada negativamente por una familia de inhibidores de serín proteasas conocida como serpinas (Travis and Salvesen, 1983). Todas las serpinas forman un complejo irreversible con el sitio activo de la serín proteasas tras una escisión proteolítica del inhibidor por la proteasa blanco, generando la pérdida de la función de ambas proteasas. Uno de los inhibidores más importantes en el sistema de la fibrinólisis, particularmente del sistema plasminógeno-plasmina, es el PAI-1.

Inhibidor del activador tisular del plasminógeno

PAI-1 es considerado el inibidor fisológico más importante de tPA y uPA en el plasma humano, formando un complejo 1:1 con el respectivo activador. Es producido y secretado de hepatocitos, plaquetas, megacariocitos, células de músculo liso (Simpson et al., 1991) y células endoteliales. En éstas últimas, su secreción es estimulada por diversos factores como la trombina, endotoxinas, dexametasona, interleucina-1, factor de necrosis tumoral y factor de crecimiento transformante β (TGF-β) (Kruithof, 1987).

PAI-1 es una glucoproteína de cadena sencilla con un peso aproximado de 52 KDa, la cual está formada por 379 aminoácidos y carece de residuos de cisteína, por lo que no presenta puentes disulfuro (Ginsburg et al., 1986, Ny et al., 1986). La estructura cristalina refleja similitud a la de otras serpinas; está conformada por tres láminas β (A, B y C), nueve α-hélices (A-I) y un loop reactivo conteniendo el sitio reactivo (Arg346-Met347) (Nar et al., 2000, Rijken and Lijnen, 2009)

El gen de esta serpina se localiza en el cromosoma 7 y está formado por 9 exones (Ginsburg et al., 1986, Loskutoff et al., 1987).

PAI-1 es secretado como una molécula activa, sin embargo, se transforma espontáneamente en una forma latente bajo condiciones fisiológicas (Chmielewska et al., 1987, Levin and Santell, 1987). Su forma activa es estabilizada por su unión a vitronectina en plasma, así como en tejidos (Declerck et al., 1988, Mimuro et al., 1987, Wiman et al., 1988); cuando se encuentra unido a vitronectina tiene un tiempo de vida media de 4 horas aproximadamente, mientras que en su forma libre el tiempo de vida media es de 2 horas. La concentración de PAI-1 en plasma bajo condiciones fisiológicas “normales” es baja, ya que oscila en los 10 μg/L (Urdén et al., 1987). En plasma, alrededor del 60% del antígeno de PAI-1 es funcionalmente activo. En plaquetas, la concentración de PAI-1 es de 100-200 μg/L, sin embargo, se encuentra en forma inactiva dentro de los gránulos-α (Booth et al., 1988, Declerck et al., 1988, Kruithof et al., 1987). La formación de complejos entre PAI-1 y los activadores del Pg es en el orden de 107 M-1 s-1 (Chmielewska et al., 1988). Cuando la concentración plasmática de PAI-1 incrementa, inmediatamente disminuye el tiempo de vida media de tPA. Esto genera una disminución en la actividad fibrinolítica (Wiman, 2000).

ANDREASEN, P. A., KJOLLER, L., CHRISTENSEN, L. & DUFFY, M. J. 1997. The urokinase-type plasminogen activator system in cancer metastasis: a review. International Journal of Cancer, 72, 1-22.

ASTRUP, T. 1966. Tissue activators of plasminogen. Fed Proc, 25, 42-51.

BOOTH, N., SIMPSON, A., CROLL, A., BENNETT, B. & MACGREGOR, I. 1988. Plasminogen activator inhibitor (PAI‐1) in plasma and platelets. British journal of haematology, 70, 327-333.

CHANDLER, W., ALESSI, M., AILLAUD, M., HENDERSON, P., VAGUE, P. & JUHAN-VAGUE, I. 1997. Clearance of tissue plasminogen activator (TPA) and TPA/plasminogen activator Inhibitor type 1 (PAI-1) complex relationship to elevated TPA antigen in patients with high PAI-1 activity levels. Circulation, 96, 761-768.

CHANDLER, W. L. 1996. The human fibrinolytic system. Critical reviews in oncology/hematology, 24, 27-45.

CHANDLER, W. L., LEVY, W. C. & STRATTON, J. R. 1995. The circulatory regulation of TPA and UPA secretion, clearance, and inhibition during exercise and during