Informe de biologia molecular, extraccion casera de platano

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PROCEDIMIENTO

- Sé tomo un tubo de ensayo con tapa, se le adiciono alcohol al 70% y se enfrió

- Se licuo un plátano en 250 ml de agua destilada por 15 segundos

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- A un vaso se le agregó 20ml de agua, una cucharada de detergente líquido y un 1/2 de sal

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- Luego se le agregó a esa mescla 3 cucharadas del licuado y agitamos por 5 minutos evitando la formación de burbujas

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- Filtramos la solución

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- Agregamos 5ml del filtrado en el alcohol y esperamos por 3 minutos

- Extraemos el ADN y lo depositamos en un tuvo eppendorf agregandole solución de rehidratación. Rotulamos y guardamos

RESULTADOS Y ANÁLISIS

El DNA Se encuentra en el interior del núcleo de las células eucariotas rodeado de proteínas (histonas) que lo mantienen unido y compactado. Para poder aislarlo y observarlo se deben deshacer la membrana plasmática y la envoltura nuclear y también se precisa la desnaturalización de las proteínas. A continuación se explicará qué pasos del procedimiento explicado anteriormente son los encargados de realizar estas funciones y también se aclarará el porqué de cada paso.

Trituración del plátano: Incrementar el área superficial del plátano ayuda a hacer la superficie de la membrana más fácil de disolver y también permite una absorción más efectiva del calor y de las soluciones que se añadirán.

El detergente: Las membranas de las células están formadas por dos capas de lípidos con proteínas transmembrana a través de estas. ayuda a romper la bicapa de fosfolípidos de las membranas plasmáticas y la envoltura nuclear. Los lípidos de la membrana se descomponen debido al detergente que deshace las uniones que mantienen la membrana junta. Cuando el detergente se pone en contacto con los lípidos éstos se separan de la membrana rompiéndola. La estructura de los lípidos es similar a la del detergente y eso hace que se combinen, formando una burbuja de detergente y lípidos.

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Imagen: Formación de burbujas entre el detergente y los fosfolípidos

Filtración: Este paso permite separar los restos de los tejidos del plátano y de las células que hemos roto en los pasos anteriores. Ese material no nos interesa y quedará retenido en el colador (los restos más grandes) o en el filtro (restos más pequeños). El líquido filtrado que conseguimos es el que contiene el DNA libre de la membrana nuclear

Alcohol frio: El DNA es una molécula polar, pero la reacción con el etanol a muy baja temperatura hace que se vuelva apolar e insoluble en el etanol formándose un precipitado justo entre la capa con etanol líquido y la capa con el extracto. El DNA es el único componente de la solución que no es soluble en el etanol, y se hace visible porque las diferentes cadenas se van aglutinando entre sí al precipitar debido a la acción de fuerzas físicas. El alcohol es menos denso que el agua del extracto y por eso flota sobre la capa del extracto.

Sal: en la solución de extracción: La molécula de DNA es soluble en agua y por tanto invisible, pero si se pone en contacto DNA que haya estado en un medio salado y alcohol frío el DNA se vuelve insoluble y precipita. Por lo tanto el agua salada ayuda a la precipitación en el alcohol. La sal también ayuda a separar el DNA de las histonas.

CONCLUSION

En esta practica se cumplieron los objetivos, se pudo extraer los cúmulos de ADN de manera sencilla.

La importancia de la extracción de ADN es el primer paso para muchos procedimientos (protocolos) de los laboratorios de Biología Molecular. Por ello los científicos deben ser capaces de separar satisfactoriamente el ADN de sustancias no deseadas que se encuentran en las células, evitando que el ADN se desnaturalice (que se rompa), todo esto para llevar a cabo investigaciones, tales como modificaciones genéticas, criminalística, marcaje de genes, entre otro

BIBLIOGRAFIA

- BRUSÉS, B. L., LUCERO, H., AGUIRRE, M. V., & GORODNER, J. (2000). Comparación de técnicas de extracción de DNA para la detección de Trypanosoma cruzi mediante la técnica de PCR. Comunicaciones científicas y tecnológicas.

- Lewin., 1995. Como extraer el ADN de forma casera. (Fecha de acceso 15 septiembre 2000) URL disponible en:http://www.medicinajoven.com/2010/05/como-extraer-adn-de-forma-casera.html.

- López D.; Mejía G. Evaluación de métodos de extracción de ADN para detección de Listeria monocytogenes en productos cárnicos. Rev. MVZ Córdoba vol.17. 2012.

ANEXOS

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