Laboratorio Cultivo Bacteriano

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- Procedimiento:

Experimento # 1

- Recolectar las bacterias de distintos puntos del colegio para obtener la mayor cantidad de variedad en las bacterias para el cultivo, esto se hace mediante el uso de un hisopo restregándolo con firmeza en la zona de la cual se quieren tomar bacterias.

- Se unta la muestra con las bacterias en la placas de Petri, se debe tener mucho cuidado para que las bacterias que van en nuestra muestra no se junten con las de nuestra respiración, se unta la muestra haciendo un movimiento en zigzag para poder tener un análisis más fácil de las bacterias al cultivarlas.

- Luego de sembrar las bacterias en las placas de Petri se dejan bajo la luz de una bombilla en una incubadora para que tengan un mejor proceso de cultivación ya que están las condiciones ideales para el crecimiento.

Experimento # 2

- Limpie y desinfecte el portaobjetos. Vierta una gota de agua destilada sobre la superficie del portaobjetos.

- Tome una pequeña muestra de su caja de Petri con un asa de inoculación (esterilizada con el mechero o encendedor).

- Pase el portaobjetos varias veces sobre la llama, hasta que esta se seque.

- Vierta una o dos gotas de violeta de genciana sobre la muestra. Espere que se seque por un minuto aproximadamente.

- Lave la lámina con abundante agua. Espere a que seque. NO LO SOPLE.

- Cubra con Lugol y deje actuar por un minuto.

- Enjuague el colorante suavemente con agua.

- Agregue el decolorante de Gram (alcohol o acetona) por 15 segundos.

- Cubra con el contra colorante de contraste (safranina o fuscina). Espere aproximadamente 1 minuto a que seque un poco. NO LO SOPLE.

- Lave la lámina con agua y seque.

- Observe bajo el microscopio.

- Datos:

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- Análisis:

En esta práctica de laboratorio de hacer un cultivo de bacterias pudimos observar que hubo varias reacciones y características después de realizar todo el proceso del cultivo y de la observación de nuestra muestra en el microscopio. Lo primero que hicimos en este laboratorio fue que primero con unos copitos fuimos a varias partes del colegio para conseguir bacterias y cultivarlas en el agar natural, por lo tanto sacamos muestras de múltiples lugares y cosas como por ejemplo: el baño, un arco de futbol, un computador, un tarro de avena, del pie, de un zapato y del suelo. Al tener las bacterias en los copitos, procedimos a coger tres agar y lo dividimos cada uno en cuatro partes iguales para poder cultivar en un mismo agar varias colonias de bacterias, al final cultivamos dieciséis colonias de bacterias y las colocamos en un lugar adecuado para que las colonias pudieran crecer y para que más adelante pudiéramos determinar a qué colonia pertenecía cada grupo de bacterias. Después de dos días y de que nuestros cultivos estuvieran en buenas condiciones de temperatura y otros factores, recogimos nuestras muestras y vimos nuestros resultados; al ver cada uno de los agar nos dimos cuenta que en la primera muestra no hubo un gran desarrollo de la colonia de bacterias puesto que lo único que se veía eran pequeños puntos blancos y eso se debió a que el tipo de bacterias cultivadas en ese agar necesitaba un poco más de tiempo para que pudieran crecer en el agar por lo tanto podemos decir que el tipo de bacterias cultivadas en el muestra número uno tenían unas propiedades de reproducción muy complejas por consiguiente no pudieron crecer como no lo esperábamos; con la muestra numero dos todo cambio ya que las bacterias cultivadas allí sí crecieron pero se destacaron las que provinieron de la suela del zapato y de una cancha de futbol porque fueron las que más crecieron las otras no se desarrollaron en su totalidad; con nuestra tercera muestra lo que ocurrió fue que algunas bacterias crecieron como puntos lisos, blancos y pequeños pero en el cultivo del pie salió un hongo llamado el Hongo pie de atleta que se considera como una infección mitótica producida por la alteración del sistema inmune, este hongo causa enrojecimiento y mucho dolor, al ver el hongo en el agar vimos que era de un color rojo oscuro y de un tamaño medio. Podemos analizar que en la primera y tercera muestra de bacterias pertenecían a la misma colonia porque eran del mismo color blanco y eran lisas, de esto podemos deducir que este tipo de bacterias que cultivamos son muy comunes en nuestro ecosistema y ya tenemos inmunidad a ellos por lo tanto no nos afectan.

Al tener preparados todos nuestras muestras con los respectivos cultivos de bacterias lo que decidimos fue analizar las bacterias de la cancha de futbol, el Hongo pie de atleta, las del baño y las de la suela del zapato, para poder realizar eso usamos la técnica llamada Tinción de Gram la cual se centra en analizar la morfología celular bacteriana o en otras palabras a identificar qué tipo de colonia pertenece las bacterias para determinar eso la tinción de Gram es de gran ayuda porque está la tinción de Gram positiva y negativa la cual ayuda a identificar el tipo de bacteria. Para realizar la tinción de Gram tuvimos que seguir muchos pasos los cuales fueron que primero desinfectar un portaobjetos adicionándole una gota de agua destilada y le pusimos calor para que quedara totalmente limpio, después con un palillo sacamos una muestra del primer cultivo que íbamos analizar que fue el de la cancha de futbol y lo colocamos encima del portaobjetos, vertimos dos gotas de violeta de metilo ( violeta de genciana) y esperamos que se secara dos minutos, al terminar ese tiempo volvimos a lavar nuestra muestra portaobjetos y le adicionamos unas gotas de Lugol, finalmente lavamos el portaobjetos le agregamos fucsina (safranina) y esperamos por 1 minuto más para que pudiéramos colocar la muestra en el microscopio. Esta primera muestra la vimos en los aumentos 4X y 10X; pudimos determinar que nuestra tinción fue Gram positiva ya que las bacterias que se podían observar quedaron de color morado oscuro y esto nos indica que pertenece a esa tinción de Gram. Para las demás muestras hicimos el mismo procedimiento.

Nuestra primer muestra