Microbiología y Laboratorio “Práctica No.2. Preparación y Esterilización de materiales y medios de cultivo”

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Agar nutritivo (AN)

Agar dextrosa papa (ADP)

Agar eosina azul de metileno (AEM)

Discusiones

Durante la preparación y esterilización de los medios de cultivo el proceso se realizo como indicaba la práctica, sin embargo, al momento de verter el medio en las cajas petri y esperar a que solidificaran los medios, el ADP se mantuvo en estado líquido, por lo cual esa parte se tuvo que volver a realizar para su uso posterior en la siguiente práctica, la literatura indica que las razones pudieron ser variadas: el medio de cultivo estaba caducado o deteriorado, el almacenamiento fue inadecuado, el agua estaba impura, la pesada fue incorrecta, probabilidad de residuos en los recipientes utilizados, agitación insuficiente o falta de homogenización.

Por otro lado el AEM se contamino en el proceso aséptico, la literatura indica que se debe manejar todo el material de tal manera que no introduzcamos microorganismos indeseables, es decir, de especies distintas a la de nuestro cultivo puro y que se encuentran tanto en los objetos como el medio ambiente que nos rodea. Para esto, se requiere que todos los medios de cultivo, los objetos de vidrio, las asas y agujas de inoculación sean estériles y en algunos casos permanezcan envueltas para que no se contaminen, además de tener una buena higiene personal, evitar estar hablando durante el procedimiento y entrar y salir del laboratorio.

Cuestionario

- ¿Qué características de un material o sustancia se requieren conocer para elegir el método adecuado de esterilización?

Todo depende del tipo de material, ya sea de vidrio o de otro tipo, o que sean tubos, portaobjetos, vasos de precipitado, azas. Ya que por su forma este afecta en el método, por ejemplo las azas o las bocas de los tubos o cosas pequeñas se recomiendan hacerlas por rojo vivo ya que tienen un área pequeña de contacto con los microorganismos, para los agares, una esterilización más efectiva se usaría el vapor ya que es una forma más eficiente para áreas más grandes como los vasos, o matraces.

- ¿Qué diferencias observó en los resultados obtenidos en tubos y en cajas petri? Explique.

La diferencia fue que en las cajas petri hubo más contaminación en comparación a los tubos y esto fue debido a que el área de contacto con el agar del tubo es mucho más pequeña que la de las cajas petri, trayendo como consecuencia menos probabilidad de contaminación.

- Describa el tipo de contaminantes microbianos que se encuentran con mayor frecuencia en las cajas de petri. ¿Cómo explican estos resultados?

Los contaminantes más comunes son bacterias, hongos, levaduras y micoplasma y pueden provenir, ya sea del material de vidrio o plástico, o bien de líneas celulares o medio contaminadas. El medio ambiente en general, que trae consigo muchos contaminantes, puede ser foco de riesgo.

- ¿Cuáles son las tres principales recomendaciones de uso correcto de la autoclave?

Para trabajar con seguridad, el personal debe recibir la formación adecuada en el uso correcto de los autoclaves y llevar ropa y equipo de protección incluyendo lo siguiente Guantes largos aislantes del calor para proteger manos y antebrazos, Bata de laboratorio para proteger partes más extensas del cuerpo, gafas de plástico para proteger los ojos y zapatos cerrados para proteger los pies de quemaduras.

Conclusión

La preparación y esterilización de materiales y medios de cultivo se logro exitosamente, sin embargo, se debe manipular el material correctamente y evitar contaminar los medios para obtener resultados correctos, de lo contrario la contaminación representara la mayor amenaza al sistema de cultivo celular dado que los organismos vivos metabolizan y se replican.

Referencias Bibliográficas:

• T Stuart Walker, Me Graw Hill, Mexico-2000-Editores S.A-Microbiología

• Jawest - Meinick y Edelberg, 16a Edición- México - Manual Moderno Microbiología Médica.

• Murray Patrick -2a Edición- 1993. Harcourt Brace- Microbiología Médica. 53

• Restrepo Ángela, Robledo Jaime. 6a Edición - Corporación Para Investigaciones

Biológicas. Fundamentos De Medicina- Enfermedades Infecciosas.