Laboratorio de Bioquímica Preparaciones Buffer

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[pic 2]

En el grafico #2 se observa al agregar NaOH al buffer TRIS, el pH se mantuvo hasta 9,65 donde se observo la capacidad máxima que tuvo el tampón a un pH 11,06. El pH se elevo de manera brusca.

Las soluciones buffer es una o varias sustancias químicas que afectan a la concentración de los iones de hidrogeno (o hidronios) en el agua. Siendo que Ph no significa otra cosa que potencial de hidrogeniones (o peso de hidrogeno), un “buffer” (o “amortiguador”) lo que hace es regular el pH

También se dice que es una solución es amortiguadora, reguladora o tampón si la (h+), es decir, si el pH de una solución no se ve afectada significativamente por la adición de pequeñas cantidades o volúmenes de ácidos y bases.

A pH bajo, la mayor parte de los grupos disociables estarán protonados, y por lo tanto habrá un gran número de cargas positivas en la proteína

A pH elevado, los grupos disociables no estarán protonados, con lo cual habrá mayor número descargas negativas

- Curva de titulación del aminoácido.

Muestra A3: 20ml

El pH de la muestra desconocida fue = 1.70

Usamos 20 mL de la muestra desconocida y agregamos en una pipeta Hcl al 0,5 molar y fuimos agregando a la solución desconocida 0.2 Ml hasta llegar a un punto en el cual el pH llegase a 12 y estos fueron los resultados:

+0.2ML

Aminoácido

pH muestra 3

+0.2ML

1.94

+0.2ML

2.05

+0.2ML

2.32

+0.2ML

2.70

+0.2ML

7.36

+0.2ML

8.25

+0.2ML

9.02

+0.2ML

9.37

+0.2ML

9.86

+0.2ML

10.19

+0.2ML

10.55

+0.2ML

10.84

+0.2ML

11.73

+0.2ML

11.88

+0.2ML

11.99

+0.2ML

12.06

+0.2ML

12.21

[pic 3]

En la grafica#3 nos podemos dar cuenta que el aminoácido problema es básico ya que tiene un grupo R + ya que posee tres mesetas una debajo del 7 y dos mesetas por encima de 7 eso nos ayuda a indicar que tipo de aminoácido es, si tiene un grupo R+ o R-. Posiblemente, el aminoácido que se nos muestra en la grafica es la arginina

En el caso del AA arginina existen dos grupos básicos y uno ácido. La disociación de la arginina se esquematiza del siguiente modo, donde pK1=2,2; pK2=9,2 y pK3=12,5:

[pic 4]

[pic 5]

Conclusión.

Los objetivos planteados en la siguiente práctica fueron cumplidos con total éxito ya que se pudo apreciar la capacidad y el cambio del pH del buffer TRIS frente a la adición de un ácido (HCl) y de la base (NaOH), también se pudo graficar la curva de valoración del pH en presencia de un aminoácido desconocido que con los datos que obtuvimos pudimos darnos cuenta que se trabajo en presencia de un aminoácido base.

Referencias Bibliográficas

- L.G wade, Jr 5 edición Química orgánica, Capitulo 24. (24.1 Introducción y 24.2 fundamentos de los aminoácidos)