Las proteínas desempeñan funciones claves en casi todos los procesos biológicos.

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Específicos

·     Aplicar uno de los principales métodos de valoración de proteínas.

·     Preparar un homogenizado de tejidos (hígado, corazón).

·     Aislar proteínas en sangre por el método de precipitación salina.

·     Construir una recta de calibración con una solución de albúmina de suero bovino como proteína patrón para el metro colorímetro de Biuret.

·     Comparar la concentración de las proteínas aisladas por precipitación salina con la de los distintos tejidos.

Materiales y Métodos

    Para cuantificar la concentración de proteínas presentes en las muestras de tejido de corazón e hígado de pollo y el suero humano, se llevó a cabo el método de Biuret. A continuación se realizará la descripción de la preparación para cada una de las muestras:

     Con una jeringa (10 cc) se extrajo una muestra de sangre humana, luego se centrifugaron 5 cc de muestra en un tubo de centrífuga durante 10 minutos a 4000 rpm; al minuto 6 la muestra estaba a 6°c. Después de centrifugado se extrae 1 ml de suero (sobrenadante) y se colocó en un tubo de ensayo para introducirlo en un beaker con hielo por 30 minutos.

    Durante este periodo de tiempo se agregaron 1,5 ml de solución salina (NaCl) y continuamente 2 ml de sulfato de amonio lentamente. Estas dos sustancias fueron agregadas a las 8:19 a.m, y a las 8:50 a.m se sacó del beaker para colocarlo nuevamente en la centrífuga por 15 minutos a 4°c y 4000 rpm. A un 1er tubo de ensayo limpio se le agregó 1,5 ml de H2O, 3 ml de Biuret y 0,5 ml de muestra; para el 2do tubo de ensayo se añadieron 1,8 ml de H2O, 3 ml de Biuret y 0,2 ml de muestra de suero.