Marcadores Virales Hepatitis

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es indicador de una infección aguda por VHB cuando se encuentra en conjunto con HbsAg. En el cuadro clínico agudo de esta infección existe un período en el cual ya ha desaparecido el HBsAg, donde el único marcador de infección reciente por VHB es el anti HBc IgM y es lo que se conoce como período de ventana.

El anti HBe aparece durante la evolución del cuadro clínico habitualmente alrededor de las 20 semanas. Su presencia se correlaciona con la negativización del HBeAg, y disminución o cese de la replicación viral activa.

El último anticuerpo en aparecer es el anti-HBsAg, alrededor de los 6 meses post-infección y su presencia es un indicador de resolución de la infección e inmunidad. No se encuentra este marcador en los portadores crónicos de VHB.

El estudio de los anticuerpos se realiza por técnicas inmunoenzimáticas ELISA.

3.- DNA Cualitativo y Cuantitativo: Otro marcador de gran ayuda en el seguimiento de los pacientes infectados con VHB es la detección de DNA, el cual está presente desde el comienzo de la infección y es el indicador más sensible de replicación viral activa. Su presencia en suero por tiempo prolongado es un factor de mal pronóstico y tendencia a la cronicidad. Puede encontrarse positivo en ausencia de HBeAg. En un cuadro clínico agudo reciente la ausencia de DNA es indicativo de la resolución de la infección. La negativización del HBsAg es más tardía, demorando varias semanas más en hacerse indetectable en la sangre.

La detección de ácidos nucleicos virales (DNA) se puede realizar por hibridación o por PCR.

En 1989 se demostró la utilidad de la técnica de PCR para detectar niveles mínimos de DNA de VHB en el suero. Clínicamente, es de utilidad para la evaluación pronóstica de un paciente con hepatitis aguda (a mayor tiempo de persistencia mayor probabilidad de portación crónica) y para evaluar la respuesta a la terapia antiviral (negativización del DNA) en los pacientes sometidos a tratamiento. También suele ser de utilidad frente a casos de pacientes hemodializados donde las reacciones falsas positivas para los diferentes marcadores de VHB son frecuentes y no permiten definir con precisión la existencia de una infección por este agente. En sujetos inmunocomprometidos puede existir seroconversión débil y/o tardía, por lo que la detección de DNA permite un diagnóstico precoz y específico de una infección por VHB.

Recientemente disponibles en nuestro país son las técnicas de cuantificación de DNA del VHB (carga viral) las cuales tienen su mayor utilidad para el control y seguimiento de los pacientes sometidos a tratamiento antiviral. Una disminución significativa de los niveles de DNA viral refleja una disminución de la replicación. Un resultado negativo de cuantificación debe confirmarse con un examen cualitativo de DNA, cuyo nivel de sensibilidad es mayor.

Existen diferentes métodos para la cuantificación de ácidos nucleicos, basados en técnicas de amplificación. Los métodos más utilizados a nivel mundial y disponibles en Chile son dos:

a) b - DNA Quantiplex HBV (Chiron Corp.): Su nombre deriva de branched DNA (DNA ramificado) y consiste en una amplificación de señales en base a hibridaciones sucesivas a partir de la inmovilización en fase sólida del DNA extraído de la muestra en estudio. Su unidad de medida es en Mili Equivalentes genómicos por mL (Meq / mL).

b) Monitor Amplicor HBV (Roche Lab): consiste en una amplificación del genoma viral por un método de PCR y la posterior detección del producto amplificado con técnicas inmunoenzimáticas. Su unidad de medida es copias de DNA/ ml. Por tratarse de un método de amplificación exponencial, las variaciones significativas (aumento o disminución de la replicación viral) deben evaluarse en base a cambios > o iguales a 1 log en base10. El límite inferior de sensibilidad es de 400 copias de DNA / ml.

Estos métodos de cuantificación presentan diferentes fundamentos técnicos, por lo cual no son comparables entre sí. El seguimiento de los pacientes infectados debe realizarse pre, intra y post tratamiento y debe para ello mantenerse el mismo método inicialmente utilizado.

Variación Genómica del VHB

La presencia de HBeAg en suero se ha asociado a una alta infectividad, sin embargo se ha descrito una mutación en la región pre - core del genoma del VHB que codifica para la síntesis de este antígeno. La infección por estas mutantes HBeAg negativo se han descrito en algunas regiones de alta endemia (mediterráneo, lejano oriente) asociándose con cuadros de hepatitis fulminante según algunos autores.

En los últimos años, también se ha descrito una mutación única en la región genómica S que da origen a un cambio aminoacídico en el determinante de grupo a del HBsAg. Estas mutantes de VHB, que escapan al reconocimiento inmunológico, se han detectado en niños vacunados contra VHB que tenían niveles adecuados de anticuerpos protectores neutralizantes contra este agente.

Finalmente, se describe recientemente la presencia de DNA de VHB en sujetos con niveles indetectables de HbsAg, que pudiera corresponder a niveles muy bajos de antigenemia o bien nuevas mutantes del VHB.

Marcadores de infección por VHB

Infección aguda: Anti Core IgM Positivo

HBsAg Positivo

Infección reciente: Anti Core IgM positivo

HBsAg negativo

Infección crónica: Anti core total positivo

Anti core Ig M negativo

HBsAg positivo más de 6 meses

Marcadores de control y seguimiento:

HBeAg positivo + Anti HBe negativo (replicación viral activa)

HBeAg negativo + Anti HBe positivo (baja replicación viral)

DNA serico positivo (replicación viral activa)

Anti HBs positivo: contacto antiguo con VHB, recuperación e inmunidad.

VIRUS HEPATITIS C

El VHC es un virus RNA con envoltura, género hepacivirus, familia Flaviviridae, el cual se ha logrado identificar y estudiar fundamentalmente a través de técnicas de biología