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Metodologia- Químico Bacteriólogo Parasitólogo

Enviado por   •  21 de Febrero de 2018  •  1.677 Palabras (7 Páginas)  •  313 Visitas

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(Miyata, Koyama, Kamitani, Toda, Yazawa. 2009)Los animales de estudio fueron ratas hembras con 7 semanas, se pusieron en grupos de 3, al grupo 1 se les dieron dosis de 20ml/kg agua destilada, mientras que al grupo 2 se les dio 5mg/kg de aceite de maíz, después de 24 h se obtuvo un resultado más bajo en el grupo1 que el grupo control.

(Suzuki, et al. 2011) (Odunsi, et al. 2012) (Jensen, et al. 2012) (Wilcox, et al.2014 ) ( Lange, et al. 2015) (Das, et al. 2015) Estos autores han estudiado el extracto de alginato de diversas algas y lo han administrado a ratones inducidos a obesidad por medio de dietas altas en calorías, todos ellos han llegado a la conclusión de que el alginato es eficiente a la hora de implementarse en dietas de consumo diario. Sin embargo ninguno de estos autores ha trabajado con el extracto (alginato) de L, hyperborea

Material Biológico

Alga: Se hará una extracción de alginato del alga laminaria hyperborea, la cual se va a importar del mar de Noruega por medio acuático, almacenada con agua turbia.

Animales: Se utilizaran 20 ratones de la cepa de 3-4 semanas de edad, con pesos de 250-350 g, se mantendrán a temperatura ambiente, 12 hr. en la luz y 12 en la oscuridad, con acceso libre para controlar la dieta.

Dieta: Se aplicara una dieta rica en grasa la cual contendrá galletas, chocolate, embutidos, queso, plátanos, caramelos, frutos secos, pan, leche condensada azucarada, extracto de alginato, etc.

Metodología

Obtención de la alga o extracto

Tratamiento Previo.

1. Las algas se secan directamente al sol

2. Se muelen a un tamaño de malla de 40 y se tratan con formaldehido concentrado (36.6%), con una mínima cantidad para humedecerlas.

3. Separación de Partículas. Se efectúa en dos etapas; la primera se emplea un sistema de filtración a través de un tamiz de 40 mallas, que separa hasta un 20% de los sólidos totales en suspensión; en la segunda se utiliza una centrífuga de preferencia de tipo continua para clarificar totalmente la solución.

4. Precipitación.

5. Conversión del Ácido Algínico a Alginato. El ácido algínico prensado, se desmenuza con objeto de facilitar la siguiente reacción. Las fibras se colocan en un recipiente cerrado que contiene un aspa para mezclarlas y se adiciona una cantidad de alcohol equivalente a la cantidad de agua que permanece en la mezcla después del prensado; se inicia la agitación y se adiciona una solución de hidróxido de sodio al 4%.

6. Secado. Terminada la reacción de conversión, el producto se filtra, y el alginato se prensa para eliminar el exceso de alcohol

7. Las fibras de alginato prensadas se separan manualmente y se secan con aire a 60°C.

8. Finalmente se encapsulan

Vía de administración.

El extracto de alga será administrado de forma oral por medio de una Cánula alimentación 20g 0,9x38

Grupo experimental.

1. Un total de 10 ratones fueron inducidas a una dieta alta en grasas, durante un periodo de 3 semanas.

2. A estas se les administro un 10% de alginato, durante 2 semanas

3. Se mantuvieron en observación durante las dos semanas que fueron inducidas a la dieta de alga.

Medida de peso

La valoración del peso corporal de los ratones se realizó a través de una balanza analítica marca ohaus modelo pa214. Se colocó el raton en un frasco ligero sobre la balanza esto con el objetivo de evaluar el peso corporal en gramos (g)

Materiales:

- Malla de 40

- Molino

- Formaldehido 36.6%

- Ampolla de decantación

- Filtros de drenado

- Centrifuga

- Alcohol al 70%

- Hidróxido de sodio 4%

- Pistola de calor (con alcance de 60 grados centígrados)

- Alginato de laminaria hyperborea

- Cánula alimentación 20g 0,9x38

Diseño Experimental

El peso de los ratones se someterá a análisis estadístico utilizando ANOVA con 3 tratamientos diferentes y diez repeticiones para comprobar si existe una diferencia significativa o no entre las tres dietas con 0,05 de significancia.

Tabla de resultados brutos.

Tratamientos

Peso primera semana (g)

Peso cuarta semana(g)

[pic 2]

[pic 3]

[pic 4]

Desviacion Estandar

Ratones sanos

25

26.3

263

69,169

26.3

33.71

25

26.2

25

26.1

25

26.4

25

26.7

25

26.6

25

26.8

25

26.3

25

25.7

25

25.9

Ratones inducidos a obesidad

31.7

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