Microscopio. Los sistemas de lentes son el condensador, objetivos y los oculares

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Oculares negativos de Huygens: están constituidos por dos lentes planos convexos, con la superficie convexa dirigida hacia abajo. Entre ambas se sitúa un diafragma anular, localizado en el plano focal de las lentes.

Prismas: son estructuras transparentes que en el caso de los microscopios monoculares, sirven para desviar los rayos luminosos de la trayectoria rectilínea del eje óptico del objetivo y luego hacia el ocular.

En los binoculares, los prismas separan los rayos luminosos provenientes del objetivo, en dos haces de luz y los dirigen a cada ocular.

Componentes de iluminación: instrumentos que proporcionan energía luminosa al microscopio. Ya sea natural o artificial, la primera es emitida por el sol mediante un espejo que posee una superficie plana y la otra cóncava. Y la artificial se genera a través de una lámpara de bajo voltaje que mediante el reóstato regula la emisión y la intensidad de la luz.

Poder de penetración o de profundidad de campo: esto es inversamente proporcional al aumento propio de los mismos.

Distancia libre de trabajo: es la distancia que existe entre la superficie de la laminilla cubreobjetos y la lente frontal del objetivo.

Formación de la imagen a través del microscopio fotónico: la imagen total del microscopio fotónico se forma mediante las imágenes que generan sucesivamente el objetivo y el ocular.

Tipos de microscopios fotonicos:

Microscopio de transparencia o de campo claro:

Este microscopio se caracteriza porque emplea luz natural o luz artificial como energía luminosa para formar las imágenes del objeto que se observa.

Microscopio de campo oscuro:

Se denomina así por que la imagen que se forma está constituida por una serie de estructuras brillantes sobre un fondo oscuro

Microscopio de contraste de fases:

Es el microscopio fotónico más utilizado para observar objetos o estructuras transparentes sin teñir. Al igual que el microscopio de campo oscuro facilita la observación de células vivas para distinguir y analizar sus componentes morfológicos y ciertas funciones que ellas puedan desarrollar

Microscopio de contraste interferencial diferencial (cid) o de Nomarski:

Este tipo de microscopio fue diseñado y construido basándose en los principios ópticos semejantes al microscopio de contraste de fases, porque la imagen se genera utilizando las diferencias de fase de los rayos luminosos que atraviesan el objeto observado.

Microscopio de luz polarizada:

Una serie de componentes biológicos, vegetales y animales, celulares o tisulares están constituidos por moléculas que por su organización cristalina, paracristalina o fibrilar en su estructuración bioquímica, adoptan determinada orientación en el espacio. Estas estructuras orientadas en el espacio con un arreglo molecular especial, interactúan con las ondas luminosas que incidan en ellas de formas muy variadas, dependiendo de cómo ese objeto esta orientado.

Microscopio de fluorescencia o de radiación ultravioleta:

Ciertas sustancias naturales o artificiales poseen la propiedad que cuando son estimuladas por energía de cierta longitud de onda absorben esta energía y emiten fotones que integran ondas visibles de luz, de longitudes de onda siempre mayores que las ondas con las que fueron excitadas. Este fenómeno se denomina fluorescencia. La luz emitida se observa en forma de destellos coloreados sobre un fondo oscuro.

Los fluorocromos se emplean para demostrar una serie de componentes celulares o tisulares pues al unirse de manera específica a algunos de ellos y ser excitados por radiación ultravioleta o longitudes de onda menores (azul, violeta) resplandecen ofreciendo imágenes de colores diferentes, generalmente de longitudes de ondas azules, verdes, amarillas, naranjas o rojas.

Existen dos tipos de fluorescencia: natural o autofluorescencia se produce cuando determinadas estructuras o sustancias animales o vegetales, al ser excitadas con radiación ultravioleta irradian fluorescencia. fluorescencia artificial. Es aquella que irradian, de manera específica, determinadas estructuras celulares o tisulares cuando son “coloreadas” por fluorocromos” y observadas a través del microscopio de fluorescencia.

Los aditamentos son:

Fuente luminosa de gran potencia que preferentemente emita radiaciones UV, violeta, azul y verde.

Filtros selectores o excitadores encargados de filtrar y seleccionar las ondas radiantes de aquellas que no se desean emplear.

Filtro protector o de barrera. Es un filtro de color amarillo; está localizado entre el objetivo y el tubo óptico. Es indispensable utilizarlo para bloquear algún tipo de radiación ultravioleta que pueda haberse trasmitido o reflejado y que no ejerció en la muestra actividad excitatoria.

Objetivos de fluorita. Son objetivos cuyas lentes están construidos por silicatos poseen autofluorescencia, por lo que es necesario reemplazarlos por objetivos de fluorita. En el caso del microscopio de epifluorescencia, los objetivos están diseñados y construidos para que ellos también funcionen como lentes condensadores proyectando la energía radiante uniformemente sobre la muestra.

Espejo divisor de haces. Es un aditamento propio de este tipo de microscopio. Está situado en posición oblicua por encima del objetivo. Sus características físicas solamente le permiten reflejar, hacia el espécimen la longitud de onda filtrada y seleccionada. Radiaciones que no fueron bloqueadas por el filtro

excitador atraviesan el espejo divisor y continúan su trayectoria sin ser reflejados.

Microscopio tridimensional de rastreo confocal:

Las imágenes obtenidas con los microscopios de fluorescencia, de transmisión y de epifluorescencia, tienen el inconveniente que no siempre muestran una resolución y una nitidez deseada, ya sea porque los especímenes examinados son demasiado gruesos (los componentes que fluorescen muestran varios planos focales, los que al superponerse exhiben una imagen desenfocada) o porque durante proceso de preparación de la muestra