PRACTICA EXTRACCIÓN ADN
Enviado por Antonio • 29 de Octubre de 2017 • 537 Palabras (3 Páginas) • 512 Visitas
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2. Añade una cucharada de sal.
3. Añade 25 mililitros de agua destilada. Utiliza la probeta para medirlos.
4. Pela y corta la manzana en cuadrados.
5. Añade un poco de agua en el vaso de precipitado grande y echa los trozos de manzana. Tritúralos con la batidora (la mezcla de células y agua debe ser opaca), accionando 2 veces las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células.
6. Mezcla en el recipiente grande, el triturado celular con la disolución de detergente y sal.
7. Agita con la varilla la mezcla durante al menos 5 minutos, sin formar espuma.
8. Haz pasar el líquido obtenido por un colador.
9. Utilizando la pipeta, retira 5 ml. De la mezcla a un tubo de ensayo. Añade 5 mililitros de alcohol enfriado a 0º C, deja escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del tubo de ensayo, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre la mezcla.
10. Deja reposar durante 5 minutos hasta que se forme una zona turbia entre la mezcla y el alcohol. (Mientras esperas este tiempo, puedes ir recogiendo y limpiando todos los recipientes empleados anteriormente).
11. Introduce un asa de siembra justo debajo del alcohol (la zona turbia que queda entre las 2 fases). Remueve la aguja, hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN.
12. Pasado un minuto, retira el asa atravesando la capa de alcohol, con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo, con el aspecto de un copo de algodón mojado.
13. Coloca el ADN sobre un portaobjetos y tiñe la preparación aplicando una gota del colorante azul de metileno. Deja actuar unos 5 minutos.
14. Cubre la preparación con el cubreobjetos y lávala con agua, para eliminar el exceso de colorante y teniendo cuidado de no arrastrar el ADN.
15. Observa la preparación al microscopio.
Responde a las siguientes cuestiones:
a. ¿Qué finalidad tiene el exponer las células a un detergente?
b. ¿Cuál es la función de la sal?
c. ¿Por qué echamos alcohol a la preparación?
d. Realiza un dibujo de lo observado al microscopio.
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