Procedimiento de conteo

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7.1.4 Caldo lactosa bilis verde brillante.

Formula:

- Peptona. 10.0 gr

- Lactosa. 10.0gr

- Ox-gall (sales brillantes). 20.0gr

- Verde brillantes 0.0133gr.

- Agua. 1.0L

Disolver los componentes en un litro de agua y hervir. Ajustar el pH de 7.1 a 7.4 con ácido clorhídrico 0.1 N o hidróxido de sodio 0.1 N. Distribuirlo en volúmenes de 3-5 ml en tubos de 13 x 100 mm. Con campana de fermentación. Esterilizar a 121°C por 15 minutos. El tiempo total de calentamiento no debe exceder de 30 minutos, lo que puede lograrse con el precalentamiento del autoclave.

7.1.5 Caldo EC

- Triptosa o tripicasa 20.00gr

- Lactosa. 5.0 gr

- Sales biliares. 1.5 gr

- Fosfato dibasico de potasio (K2HPO4) 4.0gr

- Fosfato ácido de potasio (KH2PO4) 1.5 gr

- Cloruro de sodio 5.00gr

- Agua. 1.0L

Disolver los ingredientes en un litro de agua y distribuir volúmenes de 3-5ml de tubos de 13 x 100 mm con campana de fermentación. Esterilizar a 121° C durante 15 minutos. El pH final debe ser 6.9 después de esterilizarse.

7.1.6 Reactivos de Kovac.

Formula:

- P - dimetil - benzaldehido. 5gr

- Alcohol amílico . 75 ml

- Alcohol clorhídrico concentrado. 25ml

Disolver el p - dimetil - amino en sal debido en el alcohol amílico. Agregar lentamente el ácido clorhídrico. Conservar en frasco ámbar.

8.0 Materiales de referencia.

Combinaciones de tubos positivos

nmp/g

9.0 Preparación o acondicionamiento de la muestra.

9.1 Si se trata de una muestra congelada de un alimento originalmente liquido o licuable, fundirla por completo (40.5-45°C) y homogeneizarla por agitación vigorosa del recipiente, según se indique en la técnica correspondiente.

9.2. En caso de ser un alimento solido congelado, se debe congelar a refrigeración de 4 a 8°C durante 18 horas y no mas de 24 horas antes de proceder su análisis.

9.3. Si la muestra es liquida o semiliquida, agitarla firmemente. Cuando el producto por analizar llena completamente el recipiente, es recomendable vacviarlo en otro (estéril) para homogeneizar lo; se debe tener cuidado evitar contaminaciones al escurrir el liquido por el labio de ambos recipientes.

9.4 Si se trata de alimentos solidos,pesar 10 o 11g de la muestra, obtenidos de diferentes zonas, auxiliandose de cuchara, cucharilla, abatelengua, espátula o cuchillo estériles, transferirlos a un vaso estéril de licuadora y agregar 90 o 99 ml de solución diluyente (según se hay pesado 10 o 11 gr respectivamente) mentada o no, según se indique en la técnica correspondiente para cada alimento.

9.5. Licuar durante 1-2 minutos hasta obtener una suspensión completa y homogénea según se indique en la técnica correspondiente a cada alimento.

9.6 Puede sustituirse el tratamiento con licuadora haciendo uso de stomacher y procediendo de tal manera que se logre una suspensión completa y homogénea de la muestra.

9.7 La anterior constituye la primera dilución de la muestra.

9.8 Contitunar la disolución de la muestra con el mismo diluyente.

La selección de las diluciones que se vallan a preparar y de aquellas que se van inocular dependen del numero esperado