Práctica 4 Elaboración del patrón de McFARLAND y medición de concentración bacteriana por turbidimetría
Enviado por Eric • 11 de Diciembre de 2018 • 1.400 Palabras (6 Páginas) • 729 Visitas
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[pic 3]
TUBO
U.F.C/ml
ABS Teórica
1
3,00
0,447
2
6,00
0,483
3
9,00
0,491
4
12,00
0,498
5
15,00
0,519
6
18,00
0,532
7
21,00
0,544
8
24,00
0,568
9
27,00
0,58
10
30,00
0,595
Tabla 3 VALORES DE ABSORBANCIA TEORICO
Fig. 2 Gráfico de absorbancia Experimental
Fig. 3 Gráfico de absorbancia Experimental /Teórico
- Determine la concentración de bacteria (UFC) en la muestra problema.
Si: [pic 4]
Entonces: [pic 5]
TUBO
ABS
Problema
[pic 6]
[pic 7]
E+08 UFC/ml[pic 8]
[pic 9]
Fig. 4 Determinación UFC/ml en muestra problema mediante método gráfico.
VI CONCLUSIONES
Con esta práctica se puede concluir que para lograr el buen resultado de cuantificación por el método de McFarland, hay que tener en cuenta algunas variables para realizar adecuadamente el procedimiento y prevenir errores, ya sea que este se basa principalmente en la medición de la cantidad de la luz dispersada o transmitida a través de un cultivo bacteriano, y si no es medido correctamente los resultados pueden variar desproporcionalmente.
A partir de los datos experimentales de absorbancia es posible determinar la concentración bacteriana (U.F.C) de una muestra desconocida.
Los métodos de dispersión de la luz son las técnicas más utilizadas para monitorear el crecimiento de los cultivos bacterianos. Son muy útiles y eficientes pero pueden llevar a resultados erróneos.
Los datos obtenidos a partir de las soluciones patrones se ajuntaron a una recta con un coeficiente de regresión igual a 0,95, demostrando la validez de la energía con la ley de Beer.
Se puede afirmar que entre los resultados experimentales y teóricos para algunos tubos la diferencia es alta como se relacionan en la tabla 1, esto en cuanto a la absorción de cada una de las muestras, ya que la concentración bacteriana de cada muestra se encuentra determinada por el del patrón de Mc Farland.
VIl PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
- ¿En qué consiste la Ley de Beer Lambert?
También conocida como ley de bouguer-lambert-beer ya que fue descubierta por Pierre bouguer, Johann lamber y August Beer.
Consiste en una relación entre la concentración y absorción de una radiación. En donde explica que hay una relación exponencial entre la transmisión de luz a través de una sustancia y la concentración de la sustancia. Establece que la absorbancia a cualquier longitud de onda, es proporcional al número o concentración de moléculas absorbentes presentes en el camino recorrido por la radiación (Alomar y Fuchslocher, 1998).
En términos más rigurosos, la energía total reflejada por una muestra, es la suma de la reflexión especular (superficial o en forma de espejo) más la reflexión difusa, que es aquella temporalmente absorbida y luego re-emitida por la muestra. Sólo esta última forma (reflexión difusa) entrega información útil acerca de la naturaleza o composición de la muestra.
La ley de Beer afirma que la totalidad de luz que emana de una muestra puede disminuir debido a tres fenómenos de la física, que serían los siguientes:
- El número de materiales de absorción en su trayectoria, lo cual se denomina concentración.
- Las distancias que la luz debe atravesar a través de la muestra. Denominamos a este fenómeno, distancia del trayecto óptico.
- Las probabilidades que hay de que el fotón de esa amplitud particular de onda pueda absorberse por el material. Esto es la absorción o también coeficiente de extinción.
- ¿Qué es un espectrofotómetro, para que sirve en el laboratorio, y que aplicaciones tienen en el laboratorio?
El espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en una muestra. El espectrofotómetro se usa en el laboratorio con el fin de determinar la concentración de una sustancia en una solución, permitiendo así la realización de análisis cuantitativos. [2]
El espectrofotómetro tiene importancia ambiental porque realiza la evaluación de emisión de gases a la atmosfera generados por la combustión de diésel en algunos vehículos que están en circulación. También es utilizado en el estudio de la estabilidad térmica de aceites vegetales, comestibles análisis del agua y el suelo, determinación de
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