RECUENTO DE STAPHYLOCOCCUS. SPP COAGALASA POSITIVA

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- METODOS Y MATERIALES

MATERIALES

- Tres tubos con 9 ml de agua peptonada.

- Fiola o frasco tapa rosca con 90 ml de agua peptonada.

- Cajas de Petri con agar Baird Parker.

- Pipetas de 1 ml estériles.

- Rastrillos.

- Caldo BHI 5 ml.

- Plasma para coagulasa.

- Muestra de producto para analizar.

- Balanzas.

METODOS

- Homogenizar la muestra y preparar las diluciones respectivas.

- Pipetear 0,1 ml de las diluciones sobre la superficie del agar.

- Extender con rastrillo el inoculo sobre toda la superficie del agar.

- Incubar las placas a 35 +- 2°C durante 48 horas.

- Después de las 48 horas, seleccionar las placas que presenten entre 20-200 colonias negras brillantes, con borde reducidos blancos y que aparezcan rodeadas de zonas claras que contrastan con el medio opaco.

- Tomar tres colonias y realizar la prueba de cuagulasa conforme al procedimiento establecido. Transferir el número de colonias a confirmar a un número igual de tubos que contienen 5 ml de caldo BHI.

- Incubar 35 +- 2°C durante 18 a 24 horas.

- Transferir, a un tubo de ensayo 0,3 ml de caldo BHI+0,3 ml de plasma, incubar 4 a 24 horas a 35°C. Se debe efectuar un control positivo y un control negativo.

- Factor de corrección=colonias positivas para coagulasa/colonias examinadas.

VI. RESULTADOS

Para la muestra del producto lácteo incubado en agar Baird Parjer encontramos el siguiente resultado:

DILUCION PURA

PRIMERA DILUCION

SEGUNDA DILUCION

Incontables

+200 UFC

61 UFC

De los resultados de la segunda dilución realizamos los cálculos pertinentes y encontramos con 2.880.000 UFC/g y de la cual tomamos dos colonias con las características para Sthaphylococcus y lo sembramos en plasma de conejo para observar la cuagulasa, se incubo 4 horas a 37°C, dando los siguientes resultados:

MESA

RESULTADO

1

Negativo

2

Negativo

3

Positivo

4

Positivo

VI. CONCLUSIONES

- Encontramos que los lácteos son buenos conductores para encontrar S. aureus.

- La mala manipulación de los alimentos puede ocasionar intoxicación.

Discusión

S.aureus es altamente vulnerable a la destrucción por tratamiento térmico y los agentes de saneamiento. Sin embargo la presencia de esta bacteria o de sus toxinas en alimentos procesados o en equipos para el procesamiento de alimentos indica un déficit en salubridad y capacitación de los manipuladores ya que es una fuente, que tiene una alta probabilidad de infectar los alimentos o lugares de trabajos.

En Colombia, según la información registrada en el Sistema de Vigilancia en Salud Pública (Sivigila) durante el año 2009 se presentaron 899 brotes de enfermedades transmitidas por alimentos, de los cuales solo en el 56% se identificó agente el patógeno (2). Según distribución por tipo de agente, el 18,4% corresponde a la presencia de Staphylococcus coagulasa positiva, tanto en alimentos (79%), como en muestras biológicas (12,7%) y superficies (8,5%); lo cual evidencia que es la primera causa de brotes de origen alimentario en el territorio nacional. Los alimentos involucrados en estos brotes son: el queso, el pollo en sus diversas preparaciones, el arroz y sus diferentes mezclas con otros alimentos y la carne preparada. Los alimentos categorizados de mayor riesgo se caracterizan por requerir alta manipulación en su proceso de elaboración.

Bibliografía

- Elika.net. Ficha Staphylococcus aureus. [Internet]; 28 de febrero de 2013. [Consultado: 2 de abr. de 16]. Disponible en: http://www.elika.net/datos/pdfs_agrupados/Documento95/7.Staphylococcus.pdf.

- Orden.G. José A. detección de enterotoxinas estafilocócicas Y TSST—1 mediante una técnica de transferencia electroforética (Tesis doctoral). [Internet]. Madrid-España: UCM; 1991. [Consultado: 2 de abr. de 16]. Disponible en: http://biblioteca.ucm.es/tesis/19911996/D/2/D2014701.pdf.

- En.wikipedia.org. Toxic Shock Syndrome Toxin [Internet]. [Actualizado el: 23 de mar de 2016; Consultado el: 2 de abr. de 16]. Disponible en: https://en.wikipedia.org/wiki/Toxic_shock_syndrome_toxin.