REPORTE “OBTENCIÓN DEL GLUCÓGENO A PARTIR DEL HÍGADO DE RATA Y SU CARACTERIZACIÓN QUÍMICA”

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TABLA 2. RESULTADOS DE LA CARACTERIZACIÓN QUÍMICA DEL GLUCÓGENO SIN HIDROLIZAR

PRUEBA

OBSERVACIÓN

MOLISH

Se obtuvo como positivo, coloración muy tenue.

BIURET

Se obtuvo como negativo: coloración azul, no violeta

NINHIDRINA

Negativo, no hay coloración

TABLA 3. RESULTADOS DE LA CARACTERIZACIÓN QUÍMICA DEL GLUCÓGENO HIDROLIZADO

HIDROLISIS

ÁCIDA

TESTIGO

AMILASA A

AMILASA B

BLANCO

TUBO 1

TUBO 2

TUBO 3

TUBO 4

TUBO 5

TUBO 6

TUBO 7

FEHLING

POSITIVO (precipitado)

NEGATIVO

POSITIVO (precippitado)

NORMAL

LUGOL

NEGATIVO

POSITIVO

NORMAL

SELIWANOFF

NEGATIVO

NORMAL

- CÁLCULOS

5.3 g. de hígado ------100% 0.371------------------------------------100%

x----------------------------7% 0.0822 peso del glucógeno------x

x=0.371 g. peso teórico máximo x= 22.15% de rendimiento

- DISCUSIÓN

La reacción de Molish es una reacción caracterizada para la identificación de aldosas y cetosas ya que la formación de furfural o derivados de éste dan una coloración violeta en la interfase. El resultado de la práctica, señalado en la tabla 2, nos indica que dio positivo donde podemos inferir que nuestro glucógeno tiene unidades de aldosas y/o cetosas. En las otras dos reacciones, Biuret y Ninhidrina, nos da negativo debido a que lo más probable es que, en la reacción de Biuret, nos indica que el glucógeno no tiene unidades de aldosas y/o cetosas, resultado que está erróneo, debido a que en Molish nos señala que debe de tener una de éstas unidades, entonces se podría tener dos ideas; que el reactivo se encontraba mal o no se llevó a cabo el procedimiento de la reacción. En la reacción de la Ninhidrina nos otorga un resultado negativo y con esto podemos decir que nuestro glucógeno no tiene grupos aminos libres.

En la caracterización, tabla 3, de glucógeno hidrolizado tenemos como positivo en la reacción de Fehling los tubos 1, 2, 3, 5 y 6 esto se debe a que la reacción de Fehling se lleva a cabo para la identificación de azúcares reductores en éste caso estos resultados fueron positivos ya que la glucosa que se encuentra presente en estos tubos, ahora el tubo 4 nos dio resultado negativo ya que la reacción aquí no se llevó a cabo ya que sólo había glucógeno y agua y al llevar a calentar no se pudo llevar a cabo el rompimiento de los enlaces.

En la reacción de Seliwanoff los tubos nos dan como negativo a la coloración rojo intenso para la afirmación de cetosas lo que nos deja inferir que nuestro glucógeno tiene unidades de aldosas.

En la reacción de Lugol nos dan positivos los tubos 4, 5 y 6 dando una coloración azul que nos indica que hay presencia de un polisacárido lineal.

La cantidad de rendimiento obtenido fue muy baja, con esto, podemos decir que la rata murió estresada y que la adrenalina que se generó degrado gran cantidad del glucógeno.

- CONCLUSIÓNES

- El procedimiento de separación fue muy selectivo y no hay presencia de aminoácidos ni proteínas, sólo carbohidratos.

- El carbohidrato es un polisacárido ramificado que tiene aldosas como azúcar reductor, y unidades de glucosa.

- La hidrolisis ácida es inespecífica, rompe enlaces α-1,4 y α-1,6

- La hidrolisis enzimática es específica, sólo rompe enlaces α-1,4 de la cadena lineal

- REFERENCIAS

- AccessMedicina. “CAPÍTULO 20: Gluconeogénesis y control de la glucosa en sangre” (Consultados en el día 22 de Octubre de 2017, 3:15 am)

- Donald Voet, Judith G. Voet, Charlotte W. Pratt. “Fundamentos de bioquímica”