RESUMEN DE BIOLOGIA CAPITULO 1 LA CÉLULA (RESUMEN)

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3.2- Los microscopios de contraste de fase y de interferencia permiten estudiar células sin teñir y por lo tanto células vivas. Se basan en que aun cuando las estructuras son sumamente transparentes a la luz visible, introducen cambios de fase o retrasos en las radiaciones que la atraviesan. Microscopio de Contraste de fase: Los pequeños cambios de fase que se producen en el objeto son ampliados y transformados en cambios de amplitudes. Que pueden ser apreciadas por el ojo humano. El objeto trasparente aparecerá entonces en diferentes tonos de gris. Esta microscopia se usa en la actualidad para la observación de células y tejidos vivos, y valiosa en el estudio in vivo de células cultivadas. Microscopio de Interferencia: se basa en los principios similares a los del microscopio de contraste de fase. Tiene la ventaja de dar resultados cuantitativos e información adicional sobre las propiedades físicas de los componentes celulares. Es posible determinar cambios en los índices de refracción. Es muy utilizado un tipo especial de microscopio de interferencia, El Microscopio de NORMANSKI, en el cual la imagen resultante tiene un efecto de relieve y sombreado característico. Presenta ventajas con el de contraste de fase en particular la de poder analizar preparaciones relativamente gruesas. La microscopia de contraste video intensificada, es cuando se conecta a un televisor y permite visualizar estructuras 10 veces menores.

3.3 – las sustancias fluorescentes absorben luz de una determinada longitud de onda y emiten luz de una determinada longitud de onda mayor. Microscopio de Fluorescencia: este microscopio posee una fuente de luz visible muy intensa. Que es filtrada por un filtro monocromático. Esta luz de onda corta ilumina el preparado y debe pasar por un segundo filtro situado dentro del microscopio. Este filtro solo deja pasar longitudes de onda mayores, elimina por completo la longitud de onda corta. De modo que la imagen microscópica será de total oscuridad, salvo por el eventual brillo de sustancias fluorescentes. Se estudian dos tipos de fluorescencia: 1) fluorescencia natural o autofluorescnecia. 2) fluorescencia secundaria, inducida por la tinción con colorantes fluorescentes, denominados fluorocromos. La aplicación mas importante reside en la capacidad de unir colorantes fluorescentes algunas inmunohemoglobinas u otras moléculas utilizadas en los métodos inmunohistoquimicos.

3.4 - El microscopio confocal se utiliza para eliminar directamente las imágenes desenfocadas, lo cual permite obtener un corte o sección óptica de gran definición. En este microscopio no se ilumina todo el preparado al mismo tiempo, sino que es barrido horizontalmente por un delgado has luminoso, la luz coherente de un laser que atraviesa un orificio diminuto. Al tiempo que la platina se mueve perpendicularmente al movimiento del haz. Las imágenes obtenidas deben atravesar una segunda abertura en otra lamina, situada confocalmente con la primera, lo cual quiere decir que si en el segundo orificio convergen los rayos luminosos (están en el foco) atraviesan la abertura y son recogidos por un detector. Pero si los rayos vienen de una parte desenfocada del preparado, no convergen en el segundo orificio y son eliminados.

3.5 - La microscopia de Polarización: difiere de los convencionales tan solo por el agregado de dos filtros polarizadores de luz. Uno de ellos el polarizador se coloca debajo del condensador y el otro (filtro analizador) se coloca por encima de las lentes del objetivo. Ambos filtros se colocan cruzados, con lo cual se suprime el paso de la luz directa. De esta manera el campos microscópico aparece homogéneamente oscuro, salvo ciertos componentes de la preparación que se pueden distinguir brillando sobre el fondo oscuro. Este método se basa en el comportamiento que tiene esos componentes de la célula y tejidos ante la luz polarizada. Si el Material es isotrópico, la propagación de la luz polarizada ocurre con la misma velocidad, ya que estas sustancias tienen el mismo índice de refracción en todas las direcciones. En cambio si el material es anisotropico la velocidad de propagación de la luz polarizada difiere según la dirección que se considere. Ya que presenta dos índices de refracción distintos. La explicación biológica de la birrefringencia consiste en que el material debe estar constituido por partículas o macromoléculas alargadas, orientadas de manera paralela en el seno del tejido o la célula. Este microscopio puede ser utilizado para el estudio histopatológico, con el fin de encontrar sustancias anormales en los tejidos, como cristales de oxalato, ciertos cuerpos extraños o sustancias amiloides.

3.6 - La microscopia de fondo oscuro: se utiliza para la identificación en fresco de algunos microrganismo de forma característica. El funcionamiento de este microscopio esta basado en el hecho de que la luz se dispersa en los límites entro los diversos materiales que poseen diferentes índices de refracción. Es un microscopio común en el cual el condensador se remplaza por otro con el cual se ilumina oblicuamente el objeto. Con el condensador de campo oscuro no entra luz directa al objetivo, y por lo tanto el objeto aparece brillante a causa de la dispersión de la luz, en un campo oscuro. Mediante este instrumento puede descubrirse estructuras mas pequeñas que con el de campo claro.

MICROSCOPIA ELECTRONICA: Existen dos tipos principales de microscopio electrónicos: 1) El microscopio electrónico de transmisión (MET) en el cual el preparado esta interpuesto en el trayecto electrónico y 2) El microscopio Electrónico de barrido (MEB) en el cual un fino haz de electrones recorre la superficie de la preparación, y brinda imágenes de tipo tridimensional. Él ME es el instrumento que permite conocer directamente la ultra estructura biológica. Utiliza la propiedad que tienen los haces de electrones de ser desviados por un campo electrostático o electromagnético. La disminución de la longitud de onda en el caso de los electrones es la responsable del gran poder discriminativo del ME. Este instrumento tiene por lo general 0.3nm en su límite de resolución. El filamento de tungsteno emite una corriente de electrones que actúa como fuente termoiónica. En los MO el aumento puede llegar a ser de 500 – 1.500x. En el ME el aumento puede ser de 20.000x. Con lentes intermedias se obtiene un aumento de 1.000.000x, mientras que los negativos pueden ampliarse fotográficamente hasta 10.000.000x. En el ME la imagen se debe principalmente a la dispersión de electrones. Cunado los electrones se acercan al objeto son repelidos por este debido a cargas o por dispersión elásticas. La imagen observada en la pantalla fluorescente es el resultado de la ausencia de esos electrones, que fueron detenidos por caer fuera de la abertura