DETERMINACIÒN DEL EFECTO ANTIOXIDANTE DE LOS ALCALOIDES DE LA HOJA DE Erythroxylum coca “Coca”.

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Objetivos

Objetivo general:

• Determinar el efecto antioxidante de los alcaloides de la hoja de Erythroxylum coca “Coca” y sus aplicaciones terapéuticas.

Objetivos específicos:

• Conocer los diferentes tipos de alcaloides que se pueden extraer de la hoja de Erythroxylum coca “Coca”.

• Conocer los diferentes métodos de identificación utilizados en la determinación de los alcaloides.

• Determinar las propiedades fármaco terapéuticas de los alcaloides de la hoja de Erytroxylum coca “Coca”.

Justificación:

Este proyecto de investigación se realizará con el propósito de efectuar el efecto antioxidante de los alcaloides de la hoja de Erythroxylum coca “Coca” para conocer sus beneficios y ayudar a prevenir al cuerpo de enfermedades como el estrés oxidativo y enfermedades anticancerígenas que son producidas por un desequilibrio celular y por un aumento en la cantidad de radicales libres, o una clara disminución en el aporte de antioxidantes a las células. Muchas veces ha venido siendo utilizada incorrectamente por la sociedad sin imaginar los grandes beneficios que se obtienen de sus alcaloides ya que hoy en día combaten distintas enfermedades, también tienen proteínas y vitaminas destinando a la planta para fines productivos de la sociedad.

Marco Teórico

La hoja de Erythroxylum coca “Coca” es una de las plantas de cultivo más antiguo de los pueblos de Sur América; es de gran importancia en Bolivia, usada habitualmente por los campesinos, Las Hoja de Coca tienen una importante fuente de antioxidantes. Erythroxylum coca o coca que en quechua significa “cuca”, es una planta de la familia de las eritroxiláceas, originaria de las escarpadas estribaciones de los Andes amazónicos. La hoja de coca contiene metabolitos primarios como proteínas, carbohidratos y lípidos; y metabolitos secundarios como alcaloides, taninos, glucósidos y aceite esencial. Los componentes principales son los alcaloides, destacándose entre ellos la cocaína, siendo para Erythroxylum coca Lam. var. Coca, conocida como "coca Huánuco" tener un promedio de cocaína de 1,1%. (Galindo et al, 2010).8.

Los Alcaloides: Cocaína, egnonina Atropina, pectina, papaína, higrina, globulina, piridina, quinolina, coniina, cocamina, reserpina, benzoina y inulina

Antioxidantes: sustancias naturales o fabricadas que ayudan a prevenir o retrasar algunos tipos de daños a las células. Los tipos son la vitamina E, flavonoides, betacarotenos, glutatión, coenzima, ácido tioctico.

Estrés oxidativo: es el efecto adverso que se produce en la sangre y los tejidos de los seres vivos al existir un incremento en la degradación de sus biomoléculas causado por radicales libres de oxigeno.

Metodología

Tipo de investigación

El presente proyecto tiene un enfoque investigación Cualitativa, de tipo básica, tiene un diseño experimental.

Unidad de análisis, universo y muestra.

Unidad de análisis

La hoja de Erythroxylum coca “coca”.

Universo.

La planta de Erythroxylum coca “Coca”

Muestra.

2 kilogramos de hoja de Erythroxylum coca “coca”.

Métodos y técnicas de investigación.

Estudio de la capacidad atrapadora de radicales libres:

Se evaluó las capacidades atrapadora de radicales libres del extracto obtenido, siguiendo el protocolo descrito para el radical violeta 2,2-Diphenyl-1-picryl hidrazyl (DPPH) que es un para neutralizar al compuesto 2,2-Diphenyl-1-picryl hidrazyl(DPPH) que es un radical libre, que presenta una intensa coloración violeta y que absorbe radiación 517 mn.

El método que utilizaremos debe ser el DPPH este estudio evalúa la actividad antioxidante usando el método del radical libre 2,2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH). Este método se utiliza para determinar la capacidad antioxidante. Cita Ponce et al. 13 d enero 2015. Evaluación de la técnica 2,2-Difenil-1-Picrilhidrazilo (DPPH) para determinar capacidad antioxidante.

Ensayo y determinación de la actividad antioxidante por el método del DPPH Preparación de la solución de DPPH.

Se pesa 5mg al 99 % en la balanza analítica, posteriormente se agrega a un matraz de aforo de 250 ml y se afora a volumen con metanol.

Ensayo con DPPH. El ensayo con DPPH para evaluar el índiceatrapador de radicales libres se realizó por triplicado en tubos de ensayos de 10 ml. Para las condiciones se toma 2 ml.de la solución de DPPH, inmediatamente se agregan de 10-100 uL de la dilución del extracto obtenido. Después de 30 min. De incubación a temperatura ambiente los tubos fueron llevados a un espectrofotómetro, para leer la absorbancia a 517nm. un blanco con metanol se realiza para el control de la solución de DPPH. Para cada ensayo se preparó en un matraz completamente cubierto en papel aluminio la solución del radical libre 1,1-difenil-2-picril-hidrazilo (DPPH) 20 mg/L en metanol grado analítico. El volumen a preparar dependía de la cantidad de muestras a evaluar y subsiguientemente se transfirió a un frasco ámbar cubierto con papel aluminio para evitar su rápida degradación.

Métodos y equipos de laboratorio.

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Material de vidrio y otros

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Matraces de aforo de 10 ml, 100ml, 250ml, 1000ml.

- Matraz de Erlenmeyer de 1000 ml, 500ml, 25 ml.

- Vasos de precipitación por 100ml

- Probeta graduada por 100ml

- Pipetas de 10ml

- Micropipeta automática de rango variable de 100 uL y 1000uL

- Mortero de porcelana y pilón

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