1 informe de microbilogia

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Previamente a la tinción, se observó la muestra fijada y se pudo identificar a los diversos microorganismos presentes, mediante la comparación de su morfología, por ejemplo en la figura 1 se pueden apreciar agrupaciones de cocos en forma de racimos, este tipo de bacteria es conocida como Staphylococcussp. En este caso al parecer no hay presencia de otro tipo de bacterias.

En la figura 2 y figura 3, se pudo apreciar pequeñas estructuras cilíndricas las cuales se identifican como bacilos, también aparecen cocos y estreptococos. Debido a que en la figura 3 el aumento es mayor, se puede distinguir algunos microorganismos transparentes que por sus formas se identifican como levaduras.

Después del uso del tinte cristal violeta se apreció mejor la silueta de los Estreptococos de ligero color violeta, algunas partes de la muestra se tiñeron menos que otras, esto es debido a que, algunas bacterias retienen mejor el colorante. El proceso de tinción se debe en algunos casos a reacciones de intercambio iónico entre el compuesto, colorante y otros elementos activos de la superficie de la muestra. (PELCZAR, M; REID, R. 1966.)

La clave de la realización de la tinción simple en seco, está en que al momento de la fijación, esta debe de ser cuidadosamente, pues se corre el riesgo de que se queme la muestra; por otro lado también al momento de retirar el exceso de cristales de violeta con agua, debe ser de una manera lenta y cuidadosa, pues se corre el riesgo de que se vaya con todo y muestra.

Según Wistreich y Lechtman (1983) el método de tinción simple le permite al microbiólogo observar las formas y la distribución general de las células, las estructuras, tales como las paredes celulares, las esporas y las cápsulas raras veces se tiñen. Para poder observar mejor las muestras en el laboratorio se realizó este proceso, por lo que se pudieron apreciar cocos, bacilos, estreptococos y estructuras de levaduras.

La figura 5 esquematiza la clasificación de las distintas formas bacterianas. Comparándolas con las imágenes obtenidas con el microscopio de la muestra de alcohol de rocoto podemos identificar cocos y bacilos, quienes tienen una estructura similar.

En bacteriología es especialmente frecuente la utilización de colorantes básicos, debido a la gran basofilia de los componentes nucleares ricos en ácidos desoxirribonucleicos y componentes citoplasmáticos ricos en ácidos ribonucleicos. (Granados y Villaverde, 1996). Esta idea es respaldada por García et al (1994), quienes afirman que los colorantes usados preferentemente son los básicos, debido a que el citoplasma bacteriano es muy basófilo por ser rico en ARN. Por el contrario, los colorantes ácidos se suelen utilizar siempre como colorantes de contraste y los colorantes neutros e indiferentes para coloraciones particulares. (GRANADOS, R.; VILLAVERDE, M. 1996.).

- CONCLUSIÓN

- Es importante la fijación, pues garantiza la integridad de la muestra durante la tinción.

- En la tinción de bacterias, usualmente, se usa colorantes básicos, debido a la naturaleza basófila del citoplasma bacteriano.

- El método de tinción con un solo colorante ayudo significativamente a diferenciar la morfología de bacilos, cocos, entre otros, presentes en las muestras estudiadas, pero no es tan específico como otras técnicas en las cuales usan más de un colorante.

- CUESTIONARIO

- ¿Cuáles son las asociaciones más frecuentes en bacterias?

Algunos géneros bacterianos se agrupan de una manera característica. Esta agrupación se debe a la tendencia de las células hijas a permanecer parcialmente adheridas después de la división celular.

Entre los más frecuentes encontramos a los cocos y bacilos, los primeros se disponen en:

- Cocos asociados en pares: Diplococos, por ejemplo Neisseria.

- Cocos asociados en cadena: Estreptococus, por ejemplo Streptococcussp.

- Cocos asociados en racimos o irregular: Estafilococus, por ejemplo Staphylococcussp.

- Cocos asociados en 4 individuos: Tétradas, por ejemplo Micrococcussp.

- Cocos asociados en cubos: Sarcinas, por ejemplo Sarcinas sp.

Mientras que en los bacilos encontramos:

- Bacilos asociados en cadenas: Estreptobacilos, por ejemplo Bacillusmegaterium

- ¿En qué rango de tamaños se definen las bacterias?

La gran mayoría de los bacilos procarioticos que han sido cultivados en el laboratorio esta entre 0.5-4um de ancho por menos de 15u de largo, pero unos cuantos procariotas grandes, como Epulopiscium Fishelsoni son mayores, con células que sobrepasan los 600 um (0.6mm). (MADIGAN, M; MARTINKO, J. 2009)

No todas las procariotas son más pequeñas que las eucarióticas, por ejemplo Thiomargarita Namibiensis (80 x 900um), pues en 1999 se descubrió en un lago de Namibia una bacteria. Bacillusmegaterium mide 1.3 x 3 um. Una bacteria relativamente pequeña es Haemophilusinfluenzae, que mide 0.25 x 1.2 um. Los organismos celulares cultivables más pequeños que existen son los micoplasmas, muchos de los cuales no superan los 0.2 um de diámetro. Las nanobacterias o ultramicrobacterias miden en torno a 0.05 um, pero la mayoría no se han podido cultivar, y sólo se pueden estudiar al microscopio.

- ¿Cuáles son las formas bacterianas más frecuentes?

Existen los cocos, bacilos, espirilos, espiroquetas. Cada una se diferencia por:

Los cocos, bacterias con morfología esférica u ovoide.

Bacilo, si tienen forma cilíndrica; espirilos cuando los bacilos se curvan en forma espiral y finalmente, las espiroquetas son aquellas con apéndices que presentan protuberancias celulares en forma de largos tubos o tallos, o en las bacterias filamentosas que forman células largas y delgadas o cadenas de células. (MADIGAN, M; MARTINKO, J. 2009)

- ¿Qué diferencia a una tinción directa de una tinción negativa?

La diferencia entre ambas es que la tinción directa tiñe a la bacteria y la negativa tiñe el fondo y no la bacteria. Es decir en la directa se tiñe a la muestra con un colorante que reaccionará directamente con el sustrato. Permite