AMBIENTE ASÉPTICO Y AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS

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En el momento de revisar los cultivos después del período de incubación (48 horas) pudimos observar que las estrías fueron prácticamente cubiertas por los microorganismos ahí desarrollados. De acuerdo con esta primera visión, no fue posible observar la disminución de las colonias mientras separábamos más las líneas. Se trataba quizá de un microorganismo que quiso extenderse por todo el agar, con ello, las colonias no se pudieron observar distintivamente.

Y bien, para poder cuantificar las UFC’s (Unidades Formadoras de Colonias), como se llevó a cabo por duplicado la siembra de nuestras colonias en las cajas Petri, se eligió la siembra con la dilución que permitía observar mejor distribuidas las colonias. En efecto, para comparar si la técnica tuvo el efecto deseado, se observó que las colonias fueran cada vez menos de cultivo a cultivo en un factor de decaimiento de aproximadamente. Se pudo constatar que tuvimos un acercamiento y dedujimos que se cumplió con el criterio de evaluación. Por lo tanto, nuestros cultivos estaban robustecidos en forma y cantidad. Exceptuando los cultivos de estría cruzada, que sufrieron la invasión. Se contaron las colonias con la muestra diluida por , cumplía con el requisito de estar en el intervalo de 25 – 300 colonias en la superficie. Realizamos los cálculos y fuer interesante el hallazgo, aunque varias muestras fueron traídas de macetas, la heterogeneidad de la cantidad de colonias fue evidente. Esto nos da un indicio de la enorme diferenciación de los suelos, y que en realidad no es posible encontrar 2 suelos con la misma composición.[pic 37][pic 38]

Teóricamente en el método de siembra por estría cruzada en placa las células quedan separadas individualmente formando colonias, en el aislamiento realizado la presencia de microorganismos provenientes del inoculo original (dilución 10-1) quedan mezcladas o muy cerca sobre el medio de cultivo y no es posible aislar alguna colonia para su estudió.

El método de siembra por dispersión o agotamiento permite aislar y cuantificar a los microorganismos, esto debido a una serie de diluciones conocidas (10-4, 10-5, 10-6) de una muestra original (dilución 10-1) permitiendo calcular el número de unidades formadoras de colonias (UFC) que en el aislamiento realizado fue de 78.

CONCLUSIONES

Se ha cumplido con el objetivo de conocer y aplicar las técnicas de siembra por estría cruzada así como por dispersión en superficie. Así como conocer sus propiedades físicas visibles (cualitativas) o la cantidad de colonias que forman. Esto es muy dependiente del estudió al cual se quieran aplicar estas propiedades que presentan los microorganismos en los medios de cultivo.

La importancia de trabajar en condiciones de asepsia y con utensilios estériles. No cabe duda que al importancia es ampliamente relevante, en la medida en que las técnicas se mejoren así como las habilidades que están inmersas en el desarrollo de esta actividad, la cuantificación de colonias microbiológicas así como la identificación de las mismas serán mucho más precisa.

CUESTIONARIO

1.- Desde el punto de vista práctico que ventajas y desventajas encontró al uso de los dos métodos de aislamiento usado.

Desventaja de estría cruzada es que pueden incinerar a los microorganismos para aislar, si no se tiene el cuidado, y la ventaja es que es un método práctico y sencillo y es un método que nos permite cuantificar las colonias formadas.

Desventajas por el método de siembra por dispersión es un método cualitativo y no cuantitativo.

Una ventaja es cuando la muestra contiene tantos microorganismos, que la dilución no se puede realizar en una sola etapa, en nuestro caso por este método los organismos se lograron aislar mejor.

2.- Que características generales tienen las colonias bacterianas que las distinguen de las colonias de hongos.

Algunas bacterias presentan organelos como las fimbrias y flagelos que les dan movilidad. Todos los hongos son inmóviles.

Las bacterias forman colonias con características definidas como:

– Formas punteadas o circulares

– Colonias elevadas, convexas e incluso planas.

– Bordes lisos, ondulados o lobulados.

– Colores, que pueden ser brillantes o mate.

En el caso de los hongos, las colonias presentan características muy diferentes:

– Formas filamentosas, rizoides e irregulares.

– Elevaciones umbilicadas (prominencia en el centro de la colonia) y algodonosas.

– Bordes filamentosos o estriados.

– Colores fuertes y muy variados normalmente son mate.

3.- ¿Por qué reportamos los datos en UFC/ ml o UFC/g en la determinación cuantitativa de microorganismos, en lugar de usar el término de células/ml o células /g?

Porque lo que se contó fueron colonias de bacterias visibles en las placas (UFC) y no las células a nivel microscópico que componían cada una de las colonias.

REFERENCIAS:

http://www.unavarra.es/genmic/microgral/Tema%2002.%20Cultivo%20de%20microorganismos.pdf

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/08_Tema_5_Cultivo.pdf

http://www.izt.uam.mx/ceu/publicaciones/MMBG/files/manual_microbiologia_general.pdf