Aislamiento de DNA Plasmídico.

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La cámara de electroforesis junto con el pozo de gel lo preparó la profesora así que procedimos a agregar la solución V que contiene el regulador tris-EDTA para disolver el plásmido y colocar una pequeña muestra a un carril del pozo y esperamos a que se llevara a cabo la electroforesis por 30 min. Después revelamos con bromuro de etidio para que se intercalen en nuestra muestra el DNA, para esto se necesita la luz ultravioleta.

El plásmido puede presentarse de tres formas, estas pueden ser súper enrollada que se desplazará más rápido en la electroforesis por lo que estará al final, lineal que se encuentra arriba de está dando un desplazamiento regular y circular relajada no tendrá un buen desplazamiento por lo que se queda cerca del pozo, si la placa se ve barrido quiere decir que se hidrolizó. Analizando nuestro carril de la placa de las figuras 1y 2, nuestro plásmido logró desplazarse correctamente esperando que el plásmido esté de forma súper enrollado.

Conclusiones:

- El plásmido debe poseer una estructura súper enrollada para que ser funcional ante la resistencia a la ampicilina.

- Si presenta una estructura súper enrollada se puede recuperar el plásmido y se puede insertar otro organismo, si es lineal no posee esa funcionalidad al estar hidrolizado.

- El DNA plasmídico se puede utilizar para replicar o mutar células humanas con ayuda de distintos enzimas.

- El DNA se puede romper o enlazar, y sabiendo que el plásmido se puede aislar, se puede introducir el DNA genómico para modificar la genética de un individuo.

Bibliografías:

- F.B. Amstrong “Bioquímica”, ed:Reverté, España, Barcelona, pp.173-175. (2008)

- Peña Antonio “Bioquímica” , ed:Limusa , México D.F., pp.112-115 (2004)

- Lehninger, “Principios de Bioquímica”,ed Omega, pp 880-890,4ta edición (2005)