BIOLOGÍA Análisis de Experimento Extracción de ADN

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Desarrollo

El experimento fue guiado por una serie de pasos los cuales son:

- Se preparan los materiales, cortando en trozos pequeños la muestra, para facilitar la separación de las células al momento de ponerlos en la licuadora. Al agregar la muestra a la licuadora se le vierte agua destilada, la cantidad de agua será la necesaria para que la muestra quede completamente cubierta, y para finalizar este paso se pone a licuar a máxima potencia para que las células queden lo más separadas posibles, y así sea más fácil extraer el ADN de su núcleo.

- Pasados 10 segundos licuando la muestra, se filtra el contenido en vasos precipitados. Ésta filtración tiene como objetivo separar lo más liquido de la muestra de lo más entero del tomate, dejando entonces las partes más pequeñas de las células, lo que posibilita a la vez ver más claramente el ADN.

- Para continuar, en un vaso precipitado se prepara una solución de lisis, la cual ayudará a destruir las membranas celulares dejándonos el ADN lo más limpio posible. Esta solución consta de 120 ml. De agua destilada, en la cual se dispondrán una cucharadita de cloruro de sodio (sal), 3 cucharaditas de bicarbonato y 2 ml. De detergente. Estos ingredientes tienen propiedades que ayudaran a destruir las membranas de la célula permitiéndonos llegar al núcleo donde se encontrará el ADN.

- Luego cuando disponemos de la muestra orgánica filtrada y la solución de lisis se mezclan para que pueda hacer efecto y destruir las membranas. Esta mezcla se hace en razón 2:1, donde por dos de lisis se agregará una de muestra. En el experimento realizado se formo una solución total de 150 ml. Por lo que se agregan 100 ml de lisis y 50 ml de muestra, una vez ya puestos en un matraz se debe agitar la mezcla por 5 minutos, esto para que el tampón de lisis haga efecto.

- Una vez pasado el tiempo predispuesto, en tubos de ensayo, se debe colocar 5 ml de la solución creada y 5 ml de alcohol, este ultimo debe agregarse después de la muestra y de manera que se deslice por las paredes del tubo lentamente. Debido a las distintas densidades de los compuestos, la muestra quedaría en el fondo del tubo, y el alcohol arriba de éste. El ADN queda en el medio de las dos sustancias o puede incluso subir completamente al medio donde se encuentra el alcohol, esto producto de que el alcohol solubiliza a el ADN.

- En otro caso, a la solución de lisis se le agrega además proteasa, una enzima que rompe las histonas, proteínas que cubren el ADN, y así poder lograr un mejor resultado.

Resultados

Bajo este experimento, los resultados no fueron del todo claros debido a que el ADN extraído no estaba completamente puro. Estaba mezclado con extractos de ARN impidiendo en cierto modo la visualización completa del material genético.

También se puede apreciar como el alcohol solubiliza al ADN dejándolo libre de partes de la celula permitiendo apreciar lo que sería la molécula de ADN.

Se observa que no existe diferencia entre una extracción con proteasa que una sin proteasa, algunos de los factores que puede influir es el tiempo de acción de esta enzima.

Discusión

Para realizar una extracción pura ocurrirá que el detergente contiene lauril sulfato de sodio, el cual limpia los trastes removiendo grasas y proteínas. Éste actúa de la misma manera en el protocolo de extracción de ADN, separando las grasas (lípidos) y las proteínas que constituyen las membranas que rodean la célula y el núcleo. Una vez que estas membranas se han roto, el ADN es liberado de la célula.

La solución de sal y jabón sirve para romper la membrana plasmática y nuclear e incluso la pared celular.

Se puede decir que se separa el ADN de la sustancia del tomate, ya que al ponerle detergente este hace que la grasa y proteínas se separen del ADN.

Bibliografía

Caprile,R.H (2012), texto del estudiante III y IV medio. 2da edición. EditSantillana del pacifico, Chile. 212 -215 pp.

http://www.slideshare.net/MercyElizabethCarchiHeras/extraccion-de-adn-de-un-tomate

http://www.astromia.com/astronomia/adn.htm

http://sapereaudere.blogspot.cl/2011/03/watson-crick-forma-helicoidal-del-adn-o.html

http://m.monografias.com/trabajos91/informe-experimento-extraccion-adn/informe-experimento-extraccion-adn.shtml