CROMATOGRAFÍA: AISLAMIENTO, PURIFICACÍON E IDENTIFICACIÓN DE CLOROFILA Y CAROTENOS DE LAS HOJAS DE ESPINACA

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Calculo 1. Valores para los Rf’s, basados en la ecuación para el calculo del factor de retención

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DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Para la cromatografía de columna se uso para la fase movil la mezcla de hexano y acetona. La razón por la que se uso una mezcla de un disolvente apolar y uno con pequeña porción polar (compuesto apolar hexano, compuesto con pequeña porción polar, acetona. Ver tabla 2) como eluyente se debio a que la muestra de espinaca estaba conformada por compuestos de baja polaridad y estos se retienen en la fase estacionaria. En la practica el eluyente por su estructura química contribuye a que los pigmentos se separen mediante equilibrios sucesivos de adsorción, de no ser así las clorofilas no se separarían ya que cuentan con estructura similar (clorofila α con un radical metilo, y, clorofila β con un grupo aldehido) que provoca una mayor polaridad de clorofila β con respecto a la clorofila α. De aquí tenemos que el pigmento verde claro (clorofila β) es más de mayor polaridad y el pigmento naranja (caroteno) es el de menor polaridad.

De esta manera, las moleculas del soluto se absorben en la fase estacionaria, y mientras se produce la elución van siendo desplazadas por las moleculas del disolvente de la fase movil. Los componentes del soluto más polares se retienen más rapidos que aquellos con menos polaridad.

Con todo esto tambien podemos determinar que las interacciones formadas entre los pigmentos más polares son del tipo dipolo – dipolo inducido. Mientras que los pigmentos menos polares y la fase movil son del tipo de fuerzas de Van der Waals.

CONCLUSIONES

La separación de pigmentos mediante mediante cromatografía se da por medio de un mecanismo de adsorción, donde se establecen equilibros de adsorción – desorción que depende de la polaridad de los pigmentos y el tipo de fuerzas establecer con los componentes de la fase estacionaria y la estructura del disolvente de fase móvil. Así tenemos que la clorofila β es más polar que la clorofila α, se adsorbe más intensamente más intensamente y presenta un factor de retención (Rf) menor. Los carotenos por su parte son hidrocarburos, y aunque la deslocalización de electrones provoca fuerzas de Van der Whaals, no son suficientemente fuertes como para interactuar con la fase estacionaria, por lo que quedan disueltos en la fase movil y se arrastran con esta, presentando un mayor factor de retención (Rf).

Así tenemos que la separación de componentes de la mezcla se determina por las interacciones polares (dipolo – dipolo o fuerzas de Van der Waals) de los componentes de la misma con fases estacionaria y móvil.

REFERENCIAS

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