Cinetica enzimatica RESULTADOS EXPERIMENTALES

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3. ¿Qué concluye de su trabajo experimental?

Que para elaborar una curva patrón es importante tomar suficientes lecturas, de tal manera que si se presenta un dato experimental que sale de la tendencia se pueda suponer que hubo algún error experimental

Es de importancia que antes de realizar las mediciones experimentales se analize y determine que concentraciones de proteína se utilizarán, con el objetivo de abarcar un intervalo amplio de concentraciones; siempre y cuando se obtengan lecturas de absorbancia confiables que van de aproximadamente 0.2 a 0.8 de absorbencia, según la ley de Lambert y Beer

Que el analista tenga claro el uso de las micropipetas para un buen manejo de éstas. Consideramos que el realizar de forma correcta las mediciones es de suma importancia para obtener lecturas correctas.

Que al realizar el llenado de las cubetas lo ejecute un solo analista para disminuir la incertidumbre y además para evitar confusiones del orden o cantidad de compuestos a agregar.

4. Si pudiera repetir sus experimentos, ¿haría alguna modificación a su diseño experimental original. Justifique su respuesta. En el caso de que su respuesta fuera afirmativa, explique qué haría y por qué.

Tomaríamos más lecturas a otras concentraciones de proteína, en el caso del método por absorbencia a 280 nm, tomaríamos lectura de absorbancias de otras 4 concentraciones mayores a las indicadas en la tabla de resultados; en el método de Lowry se tomarían otras 4 lecturas de concentraciones interpoladas a las indicadas en la tabla de resultados.

Aplicar la recomendación de que sea un solo analista quien realice el llenado de las cubetas; ya que durante la experimentación se presentó confusión al intervenir varios analistas y se tuvieron que realizar nuevamente.

5. ¿Para qué casos recomienda utilizar el método Lowry y para cuáles el de Absorbencia a 280 nm?

El método UV: cuando la muestra a analizar es costosa ó de difícil aaceeso; ya que este método no es destructivo. Cuando es necesario saber de forma “inmediata” si en la muestra está presente alguna proteína (sin ser necesario saber cual tipo de proteína) esto porque el método es muy rápido y no necesita de reactivos específicos

El método de Lowry: primeramente se deben disponer de los reactivos necesarios (Folin, Cu2+) y además se requiere de mayor sensibilidad