DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA G E N É T I C A M I C R O B I A N A AISLAMIENTO DE DNA.
Enviado por tomas • 3 de Abril de 2018 • 2.481 Palabras (10 Páginas) • 403 Visitas
...
Tabla No. 2 Concentración de DNA cromosomal de E. coli W3350 (en µg/ml)
Eq
[pic 4]
1 unidad de As 260mm=50µg/ml de DNA
1
436
490.5
2
392.2
441.3
3
431.66
485.9
4
502
565
5
598
673.2
6
527.51
593.45
Calculo para concentración de DNA:
- 1er Método = g/mL[pic 5][pic 6]
Dónde:
Ae=Índice de Absorción especifica (22500 para el DNA)
b=paso de luz de la celda en centímetros
Para convertir g/ml a µg/mL multiplicar por [pic 7]
Por lo tanto= 502 µg/mL de DNA
- 2do Método
1 unidad de A 260nm=50µg/ml de DNA por lo tanto…
11.30 de A 260nm= 565µg/ml de DNA
Tabla No. 3 Pureza de DNA cromosomal de E. coli W3350 (en µg/ml)
Eq
A260/A280
A260/A230
1
1.95
2.39
2
1.95
2.45
3
1.95
2.05
4
1.91
2.26
5
1.98
2.41
6
1.96
2.43
Calculo para la pureza del de DNA:
- 1er Método = [pic 8][pic 9]
- 2do Método
= [pic 10][pic 11]
Tabla No. 4 Absorbancia del DNA cromosomal de E.coli W3350 a diferentes longitudes de onda.
ABSORBANCIA
Λ
Eq1
Eq2
Eq3
Eq4
Eq5
Eq6
230
4.1
3.59
4.76
4.98
5.573
4.897
240
6.33
5.94
6.47
7.413
8.72
8.037
250
9.25
8.77
9.77
10.692
12.921
11.626
260
9.81
8.826
9.78
11.30
13.464
11.869
270
7.63
6.926
7.65
9.116
10.658
9.39
280
5.01
4.523
5.614
5.89
6.798
6.03
290
2.185
1.971
2.15
2.50
2.898
2.64
300
0.462
0.424
0.37
0.59
0.599
0.616
[pic 12][pic 13][pic 14]
Figura 1. Espectro de absorción de DNA cromosómico de E.coli W3350
B. RESULTADOS DE DNAMAN.
- Influencia del contenido
...