Manual para la detección de Mycobacterium Tuberculosis y su resistencia a Rifampicina.

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La plataforma de diagnóstico GeneXpert ®

El sistema de diagnóstico GeneXpert fue desarrollado originalmente por Cepheid Inc. para la detección de ántrax y fue desplegado a tal efecto por el Servicio Postal de los Estados Unidos en las instalaciones de clasificación de correo. Esta aplicación requiere el desarrollo de una plataforma totalmente integrado y automatizado autónomo que podría ser operado con experiencia técnica mínima . El sistema de GeneXpert ha tenido éxito en la combinación de la preparación de muestras de acuerdo con funciones de amplificación y de detección de RT-PCR totalmente automatizadas. El sistema basado en cartuchos incorpora tecnología microfluídica y el análisis de ácidos nucleicos totalmente automatizado para purificar, concentrar, detectar e identificar secuencias de ácidos nucleicos diana a partir de muestras clínicas sin procesar.

Se ha comprobado que GenXpert es una herramienta fácil, rápida y efectiva para la detección de Mycobacterium tuberculosis y su resistencia a rifampicina en un tiempo d aproximadamente 2 horas.

DEFINICIONES

PCR. Reacción en cadena de la polimerasa: Técnica de amplificación de secuencias de DNA in vitro.

RIF. Rifampicina: Antibiótico activo frente a un gran número de infecciones bacterianas. Se utiliza en el tratamiento o prevención de la tuberculosis.

INH. Isoneazida: Utilizada en el tratamiento de la tuberculosis, debido a su eficacia se le considera como un fármaco de primera elección. La isoniazida es más eficaz y menos tóxica que otros fármacos antituberculosos incluyendo el ácido p-aminosalícilico, la capreomicina, cicloserina, etionamida y kanamicina.

EMB. Etambutol: Fármaco utilizado en el tratamiento de las infecciones por micobacterias, incluyendo la tuberculosis y las infecciones atípicas por micobacterias. Se le considera como un agente antituberculoso de primera línea y se utiliza en combinación con isoniazida, pirizamida, rifampina y/o estreptomicina en el tratamiento de la tuberculosis producida por gérmenes sensibles a la isoniazida.

PZA Pirazinamida: Se utiliza en el tratamiento de la tuberculosis siendo considerada como fármaco de primera elección. La pirazinamida es más efectiva y menos tóxica que la cicloserina, la capreomicina, la kanamicina, la etionamida y el ácido p-aminosalicílico.

Estreptomicina: Antimicrobiano bactericida del grupo de los aminoglucósidos, de administración exclusivamente parenteral. Actúa inhibiendo la síntesis proteica bacteriana a nivel del ribosoma.

TB. Tuberculosis: Enfermedad infecciosa generalmente crónica causada por las especies del género Mycobacterium, M. tuberculosis y M. bovis que se transmite del enfermo al sujeto sano por la inhalación de material infectante o a través de la ingestión de leche de vaca contaminada, respectivamente.

UFC. Unidades Formadoras de Colonias: Término que debe utilizarse para reportar la cuenta de colonias en placa, las cuales pueden surgir de una célula o de un cúmulo de células.

BCG. Bacillus Calmette-Guérin: Vacuna contra la tuberculosis. Esta se prepara a partir de extracto atenuado de Mycobacterium bovis que ha perdido su virulencia en cultivos artificiales, manteniendo su poder antigénico.

BAAR. Bacilo Ácido Alcohol Resistente: Bacterias aerobias, y no móviles, muy contagiosas, y que producen una serie de infecciones altamente prevalentes en el ser humano, entre otras, la tuberculosis y la lepra. Son bacilos finos, largos e inmóviles, y que poseen ácido-alcohol resistencia. Esto significa que son resistentes a la decoloración de la fucsina debido a la alta concentración de ácido micólico en la pared celular.

MNT. Micobacterias no causantes de tuberculosis: Tambien llamadas atípicas, son todas aquellas que no pertenecen al Complejo M. tuberculosis o M. leprae, pueden ser saprofíticas, patógenas u oportunistas, así mismo son causantes de infecciones tanto en pacientes inmunocomprometidos, como en inmunocompetentes. Estas infecciones, denominadas micobacteriosis, se localizan generalmente en los pulmones, el sistema linfático, la piel o el tejido óseo, pudiendo ser diseminadas.

MTB. Mycobacterium tuberculosis: Parásito intracelular, que pervive dentro de los macrófagos tras la fagocitosis. Debido a ello, tiende a formar granulomas, por la acumulación de sucesivas céululas gigantes multinucleadas para intentar fagocitar al microorganismo. La activación enzimática de los macrófagos provoca, a largo plazo, la llegada de nuevos tipos celulares a la región inflamada. Las células epiteloides engloban a los macrófagos formando un tejido que puede necrosarse o calcificarse, con un caseum central que caracteriza a los granulomas tuberculosos.

TB-MFR. Tuberculosis multifarmacoresistente: Se debe demostrar por cultivo la presencia de bacterias resistentes a Isoniazida y Rifampicina en forma simultánea, independientemente de la resistencia concomitante a otros fármacos.

PNTB. Programa Nacional de Tuberculosis: Organismo que fortalece la atención en los servicios de salud, especialmente el primer nivel de atención, de las personas afectadas por tuberculosis y garantiza el tratamiento de la personas afectadas por la enfermedad.

PFS. Pruebas de Farmacosencibilidad: Técnicas de laboratorio que permiten determinar in vitro si el crecimiento de los bacilos de M. tuberculosis aislados de un paciente son inhibidos (sensibles) o no (resistentes) por un fármaco.

InDRE. Instituto de Diagnostico y Referencia Epidemiológicos: Organismo que ofrece productos y servicios de diagnóstico, formación de recursos humanos, evaluación de la competencia técnica e investigación y desarrollo tecnológico, que garanticen la definición de la enfermedad mediante diagnósticos de calidad comprobada, a través de la Red Nacional de Laboratorios de Salud Pública (RNLSP), en respuesta a las necesidades de vigilancia epidemiológica.

OMS. Organizacion Mundial de la Salud: Organismo especializado en gestionar políticas de prevención, promoción e intervención en salud a nivel mundial.

LESP. Laboratorio Estatal de Salud Pública: Contribuye al fortalecimiento de la salud pública en el estado brindando informes de prueba especializados y de referencia que sirvan como instrumento confiable y oportuno para la vigilancia de los riesgos sanitarios, la vigilancia epidemiológica y la prevención y control de enfermedades.

FIND. Fundacion para la Obtención de Diagnosticos Innovadores: Organizacón que ayuda en la mejora de los métodos