NOVENA PRÁCTICA DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA II

...

Para ello se nos daban como posible aminoácidos a la cisteína, alanina y glicina y nosotros elegimos la solución problema II, hecha esta elección procedimos de la siguiente manera:

- Trazamos una línea horizontal a 1.5 cm del margen inferior de nuestro papel filtro

- Por encima de la línea, colocamos 1 gota de cada aminoácido y de la solución problema, procurando dejar cierta distancia para que no se combinaran; es decir se colocaron 4 gotitas.

- Secamos el papel con una secadora de cabello

- Repetimos los pasos 2 y 3 dos veces más para que la concentración de cada aminoácido a la solución problema fuera mayor

- Vertimos disolvente (ácido acético – n – butanol – agua) en nuestro frasco, hasta un nivel por debajo de la línea que trazamos como referencia en nuestro papel filtro

- Colocamos el papel dentro del frasco y lo tapamos.

- Esperamos aproximadamente 30 - 40 minutos a que el disolvente emparara por capilaridad nuestro papel filtro, con ello el disolvente arrastró hacia arriba las gotas de aminoácidos colocadas anteriormente.

- Secamos una vez más

- Con nuestro papel seco, lo cubrimos totalmente con ninhidrina para revelarlo.

- Finalmente volvimos a secar nuestro papel con la secadora y observamos los resultados.

Resultados:

Mientras secábamos por última vez nuestro papel filtro, nos pudimos percatar del cambio de color en cada una de las gotitas que habíamos colocado

Por su parte la cisteína cambio a un color amarillo huevo, la alanina a morado y la glicina a un tono como marrón. Por su parte la solución problema se tornó mayoritariamente morada pero también se notaba la presencia de la coloración marrón por lo que determinamos que:

La solución problema II se componía de alanina + glicina.

Conclusión

Durante la realización de esta práctica pudimos concluir que a pesar de lo sencilla que resulta se trata de un método bastante efectivo, aun cuando la química nos había comentado que esta versión de la práctica era muy sencilla pero que realmente en la práctica clínica resultaba más compleja de los que nos pudiéramos imaginar. Lo que nos llevó a pensar en los alcances en la aplicación con nuestro paciente ya que en un método más preciso como los que se pueden realizar haciendo uso de las nuevas tecnologías, el margen de error se disminuye y los resultados que se entregan son más fiables para nuestro paciente.

Dicha situación ya había sido comentada por la química, pero también nos dimos cuenta de que es una práctica en donde las muestras que se requieren son mínimas, en comparación con otras pruebas de laboratorio, ya que aquí solo se utilizan unas cuantas gotas de muestras y también que la cantidad de tiempo invertido para la realización de estudio es mínima ya que si bien los resultados no son inmediatos, el margen de tiempo tampoco es de días u horas, por lo que en poco tiempo podríamos saber con certeza el estado de salud de un paciente.

Bibliografía [Fuentes de Información]

Stryer L, Berg JM, Tymoczko JL (2003) Estructura y función de las proteínas. En: “Bioquímica”, 5ª ed. Editorial Reverté (Barcelona, España), pp. 41-76. Muestra las características de los aminoácidos: estructura, variación de su carga con el pH, etc.

Serie Académicos CBS. Cromatografía de gases y de líquidos de alta resolución México 2000. pag. 215-231 255-305.