PRACTICA DE LABORATORIO BIOQUIMICA
Enviado por d1a2r3w4i5n • 28 de Mayo de 2018 • Informes • 1.315 Palabras (6 Páginas) • 504 Visitas
PRACTICA DE LABORATORIO
BIOQUIMICA
ACCIÓN CATALITICA DE LA LIPASA PANCREÁTICA
ANDRES FELIPE ZULUAGA SERNA
1.045.025.119
DARWIN ESTIVEN SERNA SERNA
1.038.416.767
PROFESORA:
NATALIA GALEANO BAEZ
[pic 1]
FACULTAD DE INGENIERIA
TECNOLOGIA BIOMEDICA
18 DE MAYO DEL 2018
DIAGRAMA DE FLUJO:
[pic 2]
OBJETIVOS ALCANZADOS:
- Se cuantificaron los Eq-NaOH por medio de la ecuación (1) variando la cantidad de NaOH utilizada en cada una de las titulaciones de los tubos (1, 2, 3, 4, 5, 6).
- Se determino la actividad enzimática de los tubos sin ion calcio y con ion calcio, de la
lipasa pancreática al catalizar por hidrólisis una muestra de triacilglicérido.
Resultados:
Tubo | Aceite(gotas) | Solución de CaCl2 (gotas) | H2O (mL) | Fenolftaleína (gotas) |
1 | 5 | - | 10 | 3 |
2 | 5 | - | 10 | 3 |
3 | 5 | - | 10 | 3 |
4 | 5 | 0.5 | 9.5 | 3 |
5 | 5 | 0.5 | 9.5 | 3 |
6 | 5 | 0.5 | 9.5 | 3 |
Tabla 1. Cantidades de cada reactivo para cada tubo.
Tubo | Volumen de NaOH requerido |
Solución blanco | 5mL |
1 | 5.1mL |
2 | 5.1mL |
3 | 5.3mL |
4 | 5.3mL |
5 | 5.6mL |
6 | 5.9mL |
Tabla 2. Volumen de NaOH requerido para titular cada tubo.
Con la cantidad NaOH (mL) empleado en el blanco y en los tubos (1, 2, 3, 4, 5, 6) para la titulación se obtienen los Eq-NaOH así:
(1)[pic 3]
Donde;
V = Volumen empleado de NaOH en cada titulación
Vb = Volumen empleado de NaOH en la titulación del blanco
TUBO 1:
[pic 4]
TUBO 2:
[pic 5]
TUBO 3:
[pic 6]
TUBO 4:
[pic 7]
TUBO 5:
[pic 8]
TUBO 6:
[pic 9]
Tubo | Eq-NaOH | Tiempo (min) |
1 | 0.002 | 15 |
2 | 0.002 | 30 |
3 | 0.006 | 45 |
4 | 0.006 | 15 |
5 | 0.012 | 30 |
6 | 0.018 | 45 |
Tabla 3. Eq-NaOH obtenidos por medio de la ecuación 1 y tiempo de reacción.
Gráficas:
[pic 10]
Figura 1. Eq-NaOH vs Tiempo de los tubos 1, 2, 3.
[pic 11]
Figura 2. Eq-NaOH vs Tiempo de los tubos 4, 5, 6.
La lipasa son enzimas muy lábiles al calor y el pH ácido, y su acción se lleva a cabo por medio de la hidrólisis de los enlaces éster, junto con los ácidos grasos. Estas enzimas actúan mejor en pH entre 7 y 9 y temperaturas entre 37°C y 39°C y su actividad depende de la absorción sobre las partículas micelares. [3] Comparando respectivamente los tubos 1, 2 y 3 que no contienen el ion calcio con los tubos 4, 5 y 6 que contienen ion calcio pudimos determinar que este ion calcio actúa aumentando la velocidad de la reacción de la enzima en nuestro experimento, obteniendo más producto que en los casos de los tubos sin ion calcio; la lipasa pancreática su acción principal es la hidrolisis de los triacilglicéridos esta enzima se sintetiza en el páncreas en forma de zimógeno siendo secretada al duodeno a través del conducto linfático. Esta inhibición se supera mediante la acción de la colipasa, una proteína de 12 kDa que se une tanto a la interface liquido-agua como a la lipasa, anclándose y activando a la enzima. [4]
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