PROTEÍNAS. Las proteínas son biomoléculas formadas básicamente por carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno

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Tabla 3. Insolubilización reversible e irreversible.

Solución de albúmina + Reactivos

Observaciones

- Solución de albúmina+ sulfato de amonio

Presenta un cambio de coloración

- Solución de albúmina + Ácido tricloroacético

Presenta un cambio de coloración y se puede observar dos fases

Sedimento + 4 mL de agua destilada

Observaciones

- Sedimento del primer proceso

Se observa que la muestra vuelve a mostrar su estado inicial

- Sedimento del segundo proceso

No presenta cambio, queda igual

Tabla 4. Reacción xantoproteica

Procesos

Observaciones

Solución de albúmina + HNO3 20%

Sin cambios notables

Baño de agua caliente

Coloración amarilla clara

Enfriar + 3 mL NH4(OH)

Presencia de dos capas, siendo una amarilla clara y otra amarillo intenso

Tabla 5. Reacción de Biuret

Proceso

Observaciones

3 mL de solución de albúmina + 3 mL de NaOH 5 M + 5 gotas de CuSO4 0,1 M

Se observó un cambio de coloración, a violeta.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Los resultados obtenidos en la práctica, la primera parte fue la coagulación de proteínas van de acuerdo a la reacción que la clara o solución albumina presenta.

- En el tubo N° 1. la clara de huevo al estar en interacción con el agua caliente, presenta una desnaturalización, ya que al estar compuesta la clara de huevo por proteínas, sufre una ruptura en su estructura natural que es, lo que a la vista se observa como una coagulación de coloración blanca, este proceso se pudo observar a los 64°C. “Cuando la temperatura es elevada aumenta la energía cinética de las moléculas con lo que se desorganiza la envoltura acuosa de las proteínas desnaturalizándose”. [4][pic 2]

Figura. 1. Coagulación de la clara de huevo.

En el tubo N° 2. La solución albumina al entrar en contacto con la acetona reacciona presentando desnaturalización, ya que disminuye la solubilidad en agua de la mayor parte de las proteínas globulares de tal manera que precipitan de la solución.

En el tubo N° 3. La solución albumina al entrar en contacto con el HCl disminuye la concentración de pH y aumenta la de protones. Se observó una coloración blanca. El hecho de que adopte ese color blanco se debe también a que se ha producido una desnaturalización debido al cambio en el pH, puesto que el ácido clorhídrico ha hecho disminuir el pH inicial.

En el tubo N° 4. La solución albumina con NaCl reacciona químicamente y no física, ya que no se observa un cambio de coloración, es decir; se alteran sus propiedades químicas y biológicas naturales.

El tubo N° 5. La solución albumina con HNO3 reacciona formando gránulos en el tubo de ensayo esto se debe a la clara ya que está compuesta por proteínas solubles, son sensibles al cambio de pH, entonces al mezclarse con el ácido nítrico este desnaturaliza la proteína generando un cambio de coloración, a blanco.

El tubo N° 6. La solución albumina con NaOH. El Hidróxido de sodio no participa en la reacción, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar alguna reacción.

[pic 3]

Figura. 2. Resultados durante de la práctica de coagulación de proteínas.

- Precipitación de la proteína por iones metálicos pesados

Las proteínas precipitan por la acción de ciertos ácidos como el ácido Tricloroacético, ácido túnqstico, ácido molíbdico y otros; también las proteínas pueden precipitar por la acción de ciertos iones metales pesados como Hg, Zn, Cd, Cu, y Pb. Todos estos agentes hacen precipitar las proteínas por que forman con ellas sales insolubles.

El mecanismo de acción de estos agentes es la siguiente: los precipitantes ácidos forman sales insolubles con las formas catiónicas (+) de la proteína, siendo necesario efectuar el proceso de un pH más ácido que el punto isoeléctrico. A su vez los metales 4 pesados forman sales insolubles con las formas aniónicas (-) de la proteína necesitándose entonces un pH más alcalino que el punto isoeléctrico. [5]

Al adicionar el EDTA actúa como agente quelante, en su mecanismo lo que hace es formar una estructura en anillo con el ion metálico en este caso el plomo el cual impide que este metal siga con sus reacciones químicas convencionales, lo cual permite que actué de esta forma disociándose el precipitado formado. [6]

[pic 4]

Figura 4. Resultado durante la práctica de la precipitación de la proteína por iones metálicos pesados

- Insolubilización reversible e irreversible

En esta parte de la práctica se determinó que tratamiento causaba insolubilización reversible e irreversible de la albúmina.

Teniendo las dos soluciones de albumina, la primera con sulfato de amonio y la segunda con ácido tricloroacético, ambas presentaron cambios de coloración a blanco.

[pic 5]

Figura.5. 3.1. Solución de albúmina + sulfato de amonio, 3.2. solución de albúmina + ácido tricloroacético

Ambas soluciones anteriormente mencionadas se centrifugaron, y conservando solo el sedimento de cada una, siendo estos la proteína precipitada, se les agregó 4 mL de agua destilada y se observó que:

La solución con sulfato de amonio se solubilizaba completamente