Práctica #5:Extracción de Pigmentos Fotosintéticos

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pinzas para ropa, procurando que no toque el fondo del vaso ni las paredes

Se deja reposar entre 30 y 50 minutos dentro del vaso, hasta que los diferentes pigmentos se distingan en el papel, se retira y se deja secar.

Identificación de los pigmentos de la espinaca

Clorofila a – color verde fuerte o verde azulado

Clorofila b – color verde amarillento

Carotenos – color anaranjado

Xantofilas – color amarillo

Resultados:

Dentro del matraz se colocan espinacas en trozos y 50 ml de alcohol etílico. En la foto se observa el matraz después de haberse calentando en una parrilla eléctrica junto con su contenido, sin que llegue a hervir.

Se observa antes de realizar la práctica el embudo con el papel filtro, en el inferior se encuentra un vaso de precipitado de 100ml.

También se observan 4 tubos de precipitado numerados del 1 al 4 (de izquierda a derecha) antes de realizar la práctica.

Se observan tubos de ensayo graduados del 1-4 (de izquierda a derecha). En el tubo de ensayo número 1 contiene 5 ml del líquido filtrado del matraz (el matraz contenía trozos de espinacas junto con 50ml de alcohol etílico que se puso a calentar en una parrilla electrica sin dejar hervir) más 10 ml de éter de petróleo que después se agitó. El tubo de ensayo número 2 donde se vierte y se agita fuertemente 5ml del tubo de ensayo número 1; 2.5ml de solución concentrada de hidróxido de potasio; y 7 ml de agua.

Tubo de ensayo número dos, se observan dos capas la superior tiene clorofilas; y la inferior tiene carotenos y xantofilas.

Se vierte el contenido del tubo de ensayo número 2 en el embudo de decantación para dividir las dos capas, con el objetivo de separar la capa inferior (carotenos y xantofilas) que se vierte en el tubo de ensayo número 3.

Se vertió la capa inferior (carotenos y xantofilas) en el tubo de ensayo 3.

Tubo de ensayo número 3 después de haber vertido y agitado fuertemente la capa inferior (carotenos y xantofilas) del tubo de ensayo número 2; 10 ml de éter de petróleo; y 10 ml de alcohol metílico.

Aparecen dos capas la superior xantofilas y la inferior carotenos.

Tubo de ensayo número 4 después de haber vertido la capa superior (clorofila) del tubo precipitado número 2; se le añade una cantidad similar de alcohol etílico (4.4 ml). Se observan dos capas la superior es clorofila a y la inferior clorofila b.

Tubos de ensayo 1, 3, 4 (de izquierda a derecha) al finalizar la práctica. El tubo de ensayo número 1 contiene 5 ml del líquido filtrado del matraz más 10 ml de éter de petróleo que después se agitó; tubo precipitado 3 se observa dos capas la superior xantofilas y la inferior carotenos; y vaso precipitado 4 se observan dos capas la superior es clorofila a y la inferior clorofila b.

Tubos de ensayo 1,3 y 4 (de izquierda a derecha) al aplicar luz UV donde se observa de color rojo y anaranjado la presencia de clorofila.

Tubo de ensayo número 1 al aplicarle luz UV. La capa que es de color rojo-anaranjado indica presencia de clorofila.

Tubo de ensayo número 4 con dos capas la superior es clorofila a y la inferior clorofila b al aplicar luz UV.

En la cromatografía se pudo detectar de abajo hacia arriba, el color verde fuerte que significaba que había presencia de clorofila b, el verde amarillento presencia de clorofila a y el color amarillo por la presencia de xantofilas.

Observaciónes

Fueron de gran ayuda el alcohol etílico, el alcohol metílico,el éter de petróleo, el agua y la solución concentrada de hidróxido de potasio ya que sin estos no hubiera sido posible separar los pigmentos que se encontraban en las espinacas, tales como la clorofila a y b, los carotenos (perteneciente al grupo de los carotenoides) y las xantofilas (perteneciente al grupo de los carotenoides).

En el tubo de ensayo número 2 que contenía la agua, solución concentrada de hidróxido de potasio, el líquido filtrado del matraz (alcohol etílico y espinacas). Se pudo diferenciar claramente dos capas la superior que contiene clorofila (a y b) y la inferior que contiene carotenos y xantofilas.

Después se vierte la capa inferior en el tubo de ensayo número 3, y se agregó éter de petróleo y alcohol metílico. Se pudo observar dos capas la superior xantofilas y la inferior carotenos.

Por último en tubo de ensayo número 4 se vierte la capa superior del tubo de ensayo número 2, y se le agrego alcohol etílico. Se pudo observar dos capas la superior de clorofila a y la inferior de clorofila b.

A lo que se quiere llegar, es que gracias a el alcohol etílico, el alcohol metílico,el éter de petróleo, el agua y la solución concentrada de hidróxido de potasio se pudo diferenciar claramente la clorofila de los carotenos y xantofilas (tubo de ensayo número 2); las xantofilas de los carotenos (tubo de ensayo número 3); y la clorofila a de la clorofila b.

Al aplicar la luz UV se pudo observar de color rojo los tubos de ensayo donde había presencia de clorofila tanto clorofila a como clorofila b, los cuales fueron los tubos de ensayo número 1 y 4.

En la cromatografía