Práctica: TRANSFORMACIÓN BACTERIANA

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- Es necesario el uso de batas y guantes con el fin de evitar la contaminación de ropa personal de calle.

- Todo material contaminado que deba salir del laboratorio para su descontaminación (por autoclave o incineración) debe ser colocado dentro de bolsas especiales debidamente cerradas y etiquetadas. Una cinta testigo deberá ser colocada como indicativo de esterilización.

- Se debe trabajar junto a la llama de un mechero, y de existir campana de extracción, esta es la mejor zona de trabajo para evitar contaminaciones por el aire.

8.- ¿Qué es un gen reportero?

es un gen que los investigadores vinculan a una secuencia regulatoria de otro gen de interés en bacterias, cultivos celulares, animales o plantas. Ciertos genes son elegidos como reporteros porque las características otorgadas por el gen en la expresión de los organismos los hacen fáciles de identificar y medir, o porque son marcadores seleccionables

9.- ¿Qué características tiene el medio LB?

El CALDO LURIA (Luria Bertani LB) o caldo LB contiene peptona de caseína y extracto de levadura que proporcionan al medio los nutrientes necesarios para el desarrollo óptimo de la mayoría de los microorganismos. El cloruro de sodio ayuda a mantener el equilibrio osmótico. es el medio utilizado por excelencia para el mantenimiento de las cepas de E.coli recombinante en procesos de microbiología molecular.

OBJETIVO: Transformar la bacteria E. coli con el gen Green Fluorescent Protein

HIPÓTESIS: las bacterias pueden hacerse resistentes gracias a la transformación

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METODOLOGIA:

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Reporta lo siguiente: Anota la cantidad y lugar donde fueron ubicadas las células. Es importante que cuentes la cantidad total de células que expresan la GFP.

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Anota:

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Analiza tus resultados.

la característica fundamental es que el plásmido le da brillo a la bacteria en presencia de arabinosa y a la vez genera resistencia a la ampicilina.

Realize la siembra de E. coli, para hacer la comparación de los crecimiento, si la ampicilina afecta negativamente a la bacteria, ésta no crecerá o crecerá muy poco en el medio con ampicilina. Si la ampicilina no tiene efecto en la bacteria, se observará un buen crecimiento por ende una transfomacion.

Debido a que la ampicilina es un antibiótico, el resultado que se esperaría sería que matara a la bacteria. Si hay crecimiento del microorganismo quiere decir que éste es resistente a la ampicilina.

Bibliografía

Biología molecular y celular, Karp; Mc Graw Hill. Séptima edición.

Biología molecular e ingeniería genética, Herráez; ELSEVIER. Segunda edición.