Recuento de microorganismos por la técnica de siembra “Vertido en placa”
Enviado por monto2435 • 4 de Febrero de 2018 • 2.663 Palabras (11 Páginas) • 753 Visitas
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Las suspensiones de células microbianas se diluyen antes de su siembra en placa. Se siguen esta técnica cuando la muestra contiene tantos microorganismos, que la dilución no se puede realizar en una sola etapa. Por ejemplo, una suspensión con mil millones de células por mililitro debe ser diluida 10 veces para obtener una suspensión con un centenar de células por mililitro, Por tanto, se realizan diluciones seriadas (en varias etapas), normalmente de diez en diez, pero a veces de cien en cien.
Para realizar diluciones de diez en diez, se añade 1 ml de la suspensión bacteriana a 9 ml (de medio estéril o solución salina, igualmente estéril. Se agita vigorosamente para diluir las células y el proceso se repite cuantas veces sea necesario. A continuación, se puede proceder de dos maneras diferentes.
Los pasos que se llevan a cabo para obtener un cultivo por vertimiento en placa son los siguientes:
[pic 3]
RESULTADOS
Tabla No1.
Dilución
Macroscópica
10-1
Frente
Algodonoso, Blanco, Centro café.
Reverso
Borde café, centro mas claro
10-2
Frente
Algodonoso, blanco, centro café.
Reverso
Borde blanco, centro café.
La tabla No1 registra los datos obtenidos para las diluciones -1 y -2; con su respectiva observación gráfica.
Tabla No 2
Dilución
Macroscópica
Microscópica
10-3
10-4
Frente
Verde
Centro blanco
Relieve
Reverso
Relieve
Centro blanco
Borde verde
10-3
10-4
Frente
Algodonoso
Blanco
Elevado
Reverso
Borde blanco
Centro beige
10-3
10-4
Frente
Verde claro
Centro verde
Borde blanco
Reverso
Centro oscuro
Borde blanco
Control
Frente
Borde blanco
Centro morado
Elevado
Algodonoso
Reverso
Centro negro
Morado oscuro
Modado mas claro
Blanco
La tabla No2 registra los datos que se obtuvieron para los tres diferentes microorganismos que se buscaban analizar. Eso con su descripción macro y micro.
DISCUSION DE RESULTADOS
Pasado una semana de incubación de las placas de Petri que contenían las muestras de suelo se observó un crecimiento microbiano, esto se debe gracias a los factores de dilución y medio en el cual fueron sometidas. Los resultados obtenidos van disminuyendo según las concentraciones que se vayan realizando, con el fin de aislar las colonias y distinguirlas en el microscopio. En cuanto a los microorganismos, presentaron un crecimiento no uniforme.
El resultado de los hongos se debió a que, en el suelo, la mayor parte son heterótrofos, siendo comunes los bacilos esporulados, los actinomicetos que son los responsables del olor a tierra mojada, y en la rizosfera (región donde el suelo y las raíces de las plantas entran en contacto) especies de los géneros Rhizobium y Pseudomonas.
Observamos un crecimiento de hongos en el control lo cual no es normal, determinamos de esta manera que las posibles causas de este crecimiento se deben a:
Posible manipulación inadecuada de la caja Petri-control donde pudieron haberse filtrado estos microorganismos.
También al momento de hacer la dilución del agar en la caja pudimos haber dejado abierta la caja separada del mechero lo que pudo causar la filtración de bacterias.
Mientras realizábamos la dilución, quizá se filtraron bacterias provenientes de nuestra boca. (al hablar).
CONCLUSIONES
En la técnica de recuento en placa se utilizan los métodos de extensión o de vertido en placa, empleados para cultivar los microorganismos. Una vez que se han formado colonias, generalmente después de un día, se seleccionan para el recuento de colonias las placas en las que éstas están bien separadas. Las placas que tienen entre 30 y 300 colonias ofrecen una buena relación entre la rapidez del recuento y la precisión en el resultado obtenido, está técnica a diferencia de recuento directo solo observa células viables, que nos originara colonias observables. Un inconveniente es que el recuento en placa es lento y tedioso y no es muy preciso, porque la precisión depende del recuento de un número elevado de colonias. Sí esta técnica resulta mayor que 300 colonias, es porque han influido factores tales como:
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