Realizar recuento en placa con su correspondiente lectura e interpretación de resultado.

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Es necesario que las industrias conozcan la calidad microbiológica de sus productos, desde las materias primas que usan, que sepan también que todos los procesos de elaboración son mejores y por supuesto la calidad del producto final.

Para esto los métodos de análisis deben proporcionar las bases necesarias para poder emitir estándares sobre la calidad y seguridad microbiológica de los alimentos. Por esto es que antes de seleccionar un método para la detección de microorganismos, se debe conocer la sensibilidad y reproductibilidad.

Los microorganismos indicadores se han utilizado para varios fines, sin embargo, el principal objetivo de emplear bacterias como indicadores de prácticas no sanitarias es revelar las fallas de los tratamientos realizados por las empresas a los alimentos que pueden ser un peligro potencial.

Palabras Claves

Microorganismos: es un ser vivo que solo puede visualizarse con el microscopio. son estudiados por la ciencia llamada microbiología. estos son organismos dotados de individualidad pero que presentan una organización biológica elemental.

Higiene alimentaria: cierto número de rutinas que deben realizarse al manipular los alimentos con el objetivo de prevenir daños potenciales a la salud.

ETAS: Son enfermedades de transmisión alimentaria. Se refieren a cualquier enfermedad causada por la ingestión de un alimento contaminado que provoca efectos nocivos en la salud del consumidor.

Aerobios mesófilos: Los aerobios son bacterias que necesitan la presencia de oxígeno para vivir y las bacterias mesófilas son las pueden descomponer la materia orgánica a temperaturas que oscilan entre 30 y 40 C.

Recuentos altos en alimentos indican contaminación o tratamientos no satisfactorios desde el punto de vista sanitario.

Enterobacterias:son una familia de bacterias Gram negativas, pueden ser aerobias o anaerobias y fermentan glucosa

Hongos: Término que designa a un grupo de organismos eucariotas entre los que se encuentran los mohos, las levaduras y las setas.

Materiales

• 1 Frasco de agua peptonada de 225 ml

• 2 tubos de agua peptonada de 9 ml

• 150 ml de Agar Plate Count (45°C)

• 150 ml de Agar VRBG (45°C)

• 6 placas de Agar rosa Bengala

• 12 Placas Petri estériles

• Pipetas aforadas estériles de 1 ml con Propipeta

• Balanza

• Stomacher

• Estufa de incubación a 37°C

• Baño termorregulado a 45°C

• Matraz Erlenmeyer

• Varios: bolsa estéril para pesar, pinzas metálicas, bisturí

• Vaso precipitado (1 de 1Lt y otro pequeño)

• Alcohol para esterilizar

• Gradilla

• Muestra

• Marcador

Metodología

Antes de realizar cualquier actividad se procedió a limpiar la zona de trabajo con alcohol al 70% e identificar las diluciones correspondientes con las insignias de nuestro grupo junto con la sección correspondiente y la identificación de las siembras (RAM o enterobacterias). Por otro lado, la primera consideración que se debía tener al ingresar al laboratorio tenía que ver con la mantención de la condición de esterilidad de todos los materiales a utilizar durante todo el transcurso de las actividades. Esta esterilidad se mantuvo realizando todas las actividades junto a la llama del mechero.

El desarrollo del laboratorio constó de las siguientes actividades:

A) Preparación de la muestra:

Se realizó el pesaje de la muestra del flan colun light en una bolsa estéril , donde se agregó la mitad aproximadamente del líquido diluyente (agua peptonada) , luego se llevó la bolsa al Stomacher para triturar el alimento , después de este procedimiento se agregó lo que quedaba del líquido diluyente. Este volumen corresponde a la dilución -1.

B) Diluciones:

Para poder llevar a cabo este proceso a partir de la dilución -1 (bolsa) se realizaron diluciones seriadas designadas como -2 y -3. Primero se tomó 1 ml con pipeta aforada desde la bolsa y se llevó al tubo -2 que contenía 9 ml de agua peptonada. Posteriormente se cerró el tubo y se homogeneizó la muestra moviendo el tubo de un lado a otro sin agitarlo.

Finalmente desde la dilución -2 se tomó 1 ml con la misma pipeta aforada mencionada anteriormente y se llevó al tubo -3 que contenían 9 ml de agua peptonada. Finalmente se cerró y se homogeneizó el tubo igual que el anterior.

C) Siembra de Recuento de Aerobios Mesófilos (RAM):

En el laboratorio la siembra de Recuento de Aerobios Mesófilos consistió en realizar un duplicado de las tres diluciones descritas anteriormente (-1,-2 y -3), tomando 2 mL de cada dilución utilizando una pipeta aforada de 1 mL, partiendo de la muestra más diluida (-3) a la más concentrada (-1), llevando muestras de 1 mL al fondo de cada una de las placas Petri vacías (dos por cada dilución). Todo esto fue realizado junto al calor del mechero, como se explicó con anterioridad, para mantener la esterilización. Una vez colocada las muestras en las placas Petri, se agregó aproximadamente 25 ml de agar Plate Count, el cual se encontraba en estado líquido y a 45°C. Luego se mezclaron los dos líquidos de cada placa realizando movimientos delicados y circulares hacia izquierda y derecha (4 veces por lado) y finalmente un movimiento en ocho para homogenizar completamente las muestras. Por último, las placas se dejaron enfriar sin voltear y una vez frías se llevaron a incubación durante 48 horas a 37°C.

D) Siembra de Enterobacterias:

Para realizar la siembra de enterobacterias se tomó 1 mL de cada una de las diluciones realizadas