Transformación Bacteriana de E. coli

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Resultados:

Al cabo de 24 horas en las placas no se observo nada. Como resultado de éste experimento se obtuvo una transformación de bacterias deficiente, no se llevo a cabo. Esto pudo haber sido por varias fuentes de errores presente en el experimento o en el cultivo de bacterias utilizado. No se pudo observar el color azul de la colonia del grupo experimental, ni algún cambio en la placa Petri del grupo control.

Discusión de Resultados:

Mediante la practica de este experimento se buscaba entender como cambian repentinos en la temperatura pueden afectar la permeabilidad de las membranas bacterianas, con un fin de estudiar y entender como el plásmido se une al material genético de una bacteria. Se utilizo un grupo control que contenía E. Coli solamente y un grupo experimental que contenía la bacteria y los plásmidos necesarios para llevar a cabo la transformación bacteriana. Se llevo a cabo un “heat shock” como parte del procedimiento para entender como el cambio en temperatura puede afectar la permeabilidad de la membrana. Inicialmente se enfriaron los tubos para luego ser pasados a un baño termal . Ese “heat shock” debe aumentar la permeabilidad de la membrana bacteriana para que así el plásmido pueda atravesarla. Una vez el plásmido entra a la bacteria y la transforme ésta podrá metabolizar x-gal.

Como resultados del experimento no se pudo observar un crecimiento de bacterias, no se trasformo la bacteria efectivamente obteniendo una característica visual como el color azul supuesto e la colonia. Esto pudo haber sido por varias posibilidades. Entre ellas, la bacteria pudo haber estado vieja, haciéndola incapaz de soportar el proceso de transformación. Además, existe una posibilidad de que el ambiente no fuese lo estéril necesario, ocasionando la inefectividad de la transformación. También, no existe seguridad de que hubiera antibiótico en el agar, ocasionando que ambas placas, la control y la experimental, tuvieran bacterias. Otra posibilidad pudo haber sido que no se llevaron a cabo las técnicas de asepsia de forma eficaz.

En un futuro se podrán mejorar los resultados del experimento. Para ello, se tiene que mejorar el uso de las técnicas de asepsia. Al hacer esto se podrá observar que en el grupo control no habrá un crecimiento de bacterias y en el grupo experimental se podrá ver el crecimiento de una colonia color azul. También se puede experimentar cambiando el cultivo de bacteria utilizado. Además se puede estudiar como la presión que se ejerce mediante el medio en que se encuentra la bacteria, en este caso la E. Coli, afecta a esta, por ejemplo que ocurra un cambio en la morfología de la bacteria o una inactivación (Tian, 2010).

Literatura Citada:

Chung, C, S Niemela, and R Miller. "One-step preparation of competent Escherichia coli: transformation and storage of bacterial cells in the same solution." Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 86.7 (1989): 2172–2175.

Panja, Subrata , and Swati Saha. "Role of membrane potential on artificial transformation of E. coli with plasmid DNA." Journal of Biotechnology 127.1 (2006): 14-20. Print.

Pierce, Benjamin A.. "Control de la Expresión Génica en procariontes." Genética: un enfoque conceptual. 2a ed. Madrid [etc.: Médica Panamericana, 2006. 425.

Sánchez, Alfonso, and Ricardo Guerrero. "Transformación." Genética molecular bacteriana. Barcelona: Reverté, 1982. 43-49.

Tian, Ye, and Peng Sun. "Inactivation of Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis by a direct-current, cold atmospheric-pressure air plasma microjet." The Journal of Biomedical Research 24.4 (2010): 264-269.