EVALUACION DE LA ACTIVIDAD CITOTOXICA DE EXTRACTOS VEGETALES
Enviado por tomas • 9 de Diciembre de 2017 • 984 Palabras (4 Páginas) • 471 Visitas
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MATERIALES Y METODOS
Tubos Eppendorf
Muestra cultivo de insecto
Cámara de Neubauer
Microscopio óptico
Cubre objetos
Micropipeta con puntas
Para la evaluación del porcentaje de viabilidad de las células de insecto en fase de crecimiento 2×10 5 células/ml contenida en un medio TNM-FH suplementado con 10% de suero bovino y antibiótico al 1%, inicialmente en una cámara de flujo laminar se realizó el trasvase del medio de cultivo con las células a otro frasco, dejando una……………con el fin agregar en una placa de 6 pocillos diferentes cantidades de cultivo celular; dejando 3 pocillos con 250 µl y 3 con 500 µl del medio de cultivo.
Para la realización del conteo se tomó una muestra de 100 µl del cultivo de insecto y se colocó en un tubo Eppendorf, a la cual se le adiciono 50 µl de Azul de tripano 0.4, posteriormente a la cámara de Neubauer se colocó el cubre objetos y con la punta de la micropipeta se dejó fluir la suspensión de células y colorante por debajo del cubreobjetos en la cámara hasta que el área de la cuadrícula se llenó. Una vez preparada la cámara Neubauer se colocó en del microscopio óptico, y se observó y contó en el objetivo 10x en los cuadrantes 1, 2, y 3
[pic 3][pic 4]
[pic 5]
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
En el conteo de células en los cuadrantes 1, 2, Y 3 de la cámara de Neubauer se observaron, 53 células no viables y 162 células viables para un total de 214 células contadas. Se realizaron cálculos para determinar % de viabilidad y concentración de células por ml de la muestra proporcionada, cuyo valor obtenido fue 75,70% y 214 0000 cel /mL, respectivamente.
CUADRANTES
CÉLULAS VIABLES
CÉLULAS NO VIABLES
TOTAL
1
53
22
75
2
49
24
73
3
60
6
66
TOTAL
162
52
214
[pic 6]
Por lo cual se puede decir
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BIBLIOGRAFÍA
[pic 7]
[pic 8]
[pic 9][pic 10][pic 11]
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