ADQUISICIÓN DE FOSFATO COMPARATIVO EN LAS ALGAS RHIZOPHYTIC GIGANTE

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Las algas marinas de tamaño medio para cada especie se recogieron en ambos sitios a mano a partir de aproximadamente 0,5 m de profundidad, mientras que el buceo, con especial atención a la eliminación cuidadosa de las masas rizoidal del sedimento. A continuación, los individuos fueron transportados en agua de mar desde el lugar de recogida de nuevo a la Estación Marina Smithsonian en Fort Pierce, Florida, donde se colocaron en acuarios con recirculación de agua de mar mezclada InstantOcean © a 35 ppt durante 3-4 días para permitir la estabilización a la condiciones de laboratorio antes de los experimentos de adquisición de nutrientes.

2.2. Ensayos de incubación de Nutrientes

Cámaras construidas de PVC se utilizan para separar el terreno por encima de talo porciones de las masas subterráneos rizoidal en los ensayos de incubación de nutrientes (adaptado de McRoy y Barsdata, 1970 ). PVC fue de 15 cm de diámetro con un 18 cm x 18 cm de hoja de PVC unidos en la base. La cámara superior (23 cm de altura) estaba conectado a la cámara inferior (8 cm de altura) con un 3 cm de ancho acoplador de PVC. Una placa de plástico de 14 cm de diámetro con un agujero de 3,5 cm en el centro se colocó entre las dos cámaras. Las cámaras inferiores celebraron 1.5 L y se añadieron a los 3 L-cámaras superiores. Talos de algas intactos se colocaron a continuación en el aparato con rizoides sellados dentro de la cámara inferior, mientras que su talo encima de la tierra fue completamente sumergido en la cámara superior. Masilla adhesivo no tóxico se utilizó para sellar el agujero y mantener las algas en posición vertical.

Las algas marinas se incubaron durante 8 h en las cámaras aisladas mencionadas en tres tratamientos diferentes de fosfato con cuatro repeticiones por tratamiento por especie: controles (sin fosfato en el original), por encima del suelo talo exposición (fosfato añadido a solamente la cámara superior), y la exposición rizoidal ( fosfato añadido sólo a las cámaras inferiores). Para demostrar la completa falta de flujo entre las dos cámaras, rojo allura AC, se añadió E129 colorantes con el agua en la parte superior o inferior de la cámara durante los recorridos de prueba preliminares. Después de 12 h, no se observó evidencia visual de intercambio. Cada cámara se llenó con la misma agua de mar artificial utilizado en los acuarios, con picos de nutrientes adicionales para cada tratamiento. Monohidrato NaH 2 PO 4 se añadió para proporcionar 30 mM PO 4 3- , una concentración elegida para asegurar la saturación de la absorción de nutrientes, es decir, mucho más alta que normalmente reportado en la columna de agua y sedimentos alrededor de estas algas ( Lapointe et al., 1992 y Lapointe, 1987 ). Usando hipersaturando niveles de fosfato mejora sustancialmente las posibilidades de ver las diferencias en los niveles de fósforo tejido después de sólo un par de horas. Sin embargo hay que señalar que los niveles de fosfato inferiores podrían haber causado resultados diferentes.

Para dar cabida a 12 muestras por especie durante sólo 8 cámaras experimentales, dos especies se ejecutan durante un período de 3 días; un ensayo que contiene ocho muestras de cada especie separadas por un ensayo que contiene cuatro muestras de ambas especies simultáneamente, con los tratamientos asignados al azar. Luz alcanzar las algas en cada una de las ocho cámaras superiores se midió utilizando un sensor 4π Li-Cor y un promedio de 311 ± 34 micrómetros fotones m -2 s -1. Aunque este valor representa sólo una cuarta parte de la luz máxima alcanzando las algas en el sitios de recolección, que está muy por encima del punto de saturación fotosintética encontrados para especies relacionadas en otros estudios ( Littler et al., 1988 ). El separador de plástico entre las dos cámaras inhibió de luz que entra las cámaras inferiores. Mientras que la luz puede afectar la absorción de nutrientes, rizoides son normalmente enterrados en los sedimentos y podrían no estar expuestos de forma natural a la luz. Las cámaras se colocaron en un baño de agua en un laboratorio húmedo del aire acondicionado y la temperatura del agua se mantuvo dentro de 23 a 24 ° C durante los experimentos, lo que representa un valor de temperatura intermedia para ambos sitios de campo.

2.3. Procesamiento de tejidos

Inmediatamente después de la prueba de incubación, las algas marinas se enjuagaron con agua destilada y las dos porciones talo se separaron con una hoja de afeitar, que se enjuagó y se secó después de cada incisión. El por encima del suelo talo porciones se coloca directamente en 20 mL viales de centelleo de plástico y se secó durante 48 horas a 65 ° C. El tejido se homogeneizó mediante la adición de dos rodamientos de bolas de acero limpias a cada tubo de molino de bolas y se coloca en un molino durante tres minutos. Las muestras de tejido fueron enviados a la Universidad de Maryland Laboratorio Biológico Chesapeake donde una versión modificada del método desarrollado por Aspila et al. (1976) se utilizó para determinar el contenido total de fósforo de las muestras.

2.4. Los análisis estadísticos

Se utilizó el análisis unidireccional de la varianza (ANOVA) para probar los efectos del tratamiento sobre el fósforo por ciento de tejido para cada especie (se utilizó el test de Levene para comprobar la homogeneidad de la varianza). Agrupaciones post hoc Tukey por tratamientos se utilizaron para probar las diferencias significativas entre tratamientos. Todos los análisis estadísticos se realizaron con SYSTAT 12 y se consideraron significativas con p

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Fig. 1. Porcentaje de fósforo tejido después de la incubación por tratamiento agrupado por especies. Los valores son la media ± SE y 95% CI P -valores para un solo sentido se incluyen ANOVA. Tenga en cuenta la diferencia en la escala de Halimeda .

3. Resultados

El análisis de varianza no encontró tendencias en ciento talo fósforo tejido por el tratamiento, ya sea paraC. lanuginosa o A. nigricans , probablemente debido a la alta variación en el inicio (control) valores de fósforo por ciento de tejido ( Fig. 1 ). En contraste, se detectó un efecto significativo del tratamiento para dos especies calcificadas, H. incrassata y P. capitatus . En H. incrassata , agrupaciones post hoc de Tukey mostraron un aumento significativo en talo contenido de fósforo después de la exposición de fosfato a cualquiera porción talo, así como un aumento en talo contenido de fósforo cuando el fosfato se expuso a la tierra por encima de talo en comparación