Como hacer un Informe Color de los Compuestos

...

Luego se preparó el segundo blanco, midiendo en el segundo tubo de ensayo (B2), 4.30 mL de amortiguador, 0.30mL de suspensión mitocondrial, 0.20mL de la solución de canela y 0.20 mL de sucinato. Rápidamente después de haber echado el sucinato, el tubo de ensayo se cubrió fuertemente con papel de secar y fue mezclado adecuadamente en un agitador de vibración por aproximadamente un minuto. De la misma manera que con el primer tubo de ensayo, se echó todo lo que cupo hasta ¼ de pulgada del borde de (esta vez) la celda identificada con el B2. Esta segunda celda B2 ya preparada se colocó adentro del segundo espectrofotómetro. Se tuvo que utilizar dos espectrofotómetros diferentes ya que unas celdas iban a contener canela y otras no, ya que la diferencia en color imposibilita el medir una transmitancia correcta en solo uno de los espectrofotómetros. La preparación de estos blancos se debe a que ellos corregirán las diferencias en transmitancias debido a la solución mitocondrial. Ya con los blancos adentro de sus respectivos espectrofotómetros se pudo comenzar la preparación de las celdas experimentales.

Para preparar la primera celda experimental (1) se midió en el primer tubo de ensayo experimental 4.40 mL de amortiguador, 0.30 mL de DPIP, 0.30 mL de la suspensión mitocondrial y por último 0.20 mL del sucinato. A esta muestra no se le agregó canela. Rápidamente el tubo de ensayo se cubrió fuertemente con un pedazo de papel de secar y se mezcló adecuadamente utilizando un agitador de vibración. De la misma manera que en las veces anteriores, se echó todo lo que cupo hasta ¼ de pulgada del borde de (esta vez) la celda identificada con el 1. Esta celda (1) se colocó en el primer espectrofotómetro. Esta primera muestra experimental (1) sería el Grupo Control Positivo.

Para la segunda celda experimental (2) se midió en el segundo tubo de ensayo 4.30 mL de amortiguador, 0.30 mL de DPIP, 0.30 mL de la suspensión mitocondrial y 0.20 mL de la solución de canela. A esta muestra no se le echó sucinato. Luego, el tubo de ensayo se tapó fuertemente con un pedazo de papel de secar y se mezcló adecuadamente utilizando un agitador de vibración. De la misma manera que con las veces anteriores, se echó todo lo que cupo hasta ¼ de pulgada del borde de (esta vez) la celda identificada con el 2. Esta celda (2) se colocó en el segundo espectrofotómetro. Esta segunda muestra experimental (2) sería un Grupo Experimental.

Para preparar la tercera celda experimental (3) se midió en el tercer tubo de ensayo experimental 4.20 mL de amortiguador, 0.30 mL de DPIP, 0.30 mL de la suspensión mitocondrial 0.20 mL de sucinato y 0.20mL de canela. Inmediatamente luego de echarle el sucinato, el tubo de ensayo se tapó fuertemente con un pedazo de papel de secar y se mezcló adecuadamente utilizando un agitador de vibración. De la misma manera que con las veces anteriores, se echó todo lo que cupo hasta ¼ de pulgada del borde de (esta vez) la celda identificada con el 3. Esta celda (3) se colocó en el segundo espectrofotómetro. El resto de solución que quedó en cada tubo de ensayo fue descartado utilizando las debidas medidas de seguridad. Aunque realmente no se trabajó con ningún químico reactivo, así que todo se pudo lavar en el fregadero común. Esta tercera muestra experimental (3) sería otro Grupo Experimental.

- Medición de transmitancia

Ya una vez todas las muestras estaban preparadas y debidamente colocadas en sus respectivas celdas y espectrofotómetros, se comenzó con la medición de transmitancia. Se decidió medir la transmitancia de cada celda en cada espectrofotómetro, a la misma vez en intervalos de 3 minutos hasta llegar a media hora. Antes de cada lectura de transmitancia se midió la transmitancia de los blancos, para así calibrar las maquinas. Los datos fueron apuntados en las tablas de resultados. Luego de los 30 minutos y al finalizar la tabla de datos, se descartó el contenido de cada una de las celdas y estas fueron limpiadas y secadas. El área de trabajo también fue debidamente limpiado y secado. Los espectrofotómetros fueron apagados y desconectados.

Datos Experimentales

Tabla I: Contenido de Celdas Experimentales

Celda

Amortiguador

DPIP

Suspensión Mitocondrial

Sucinato

Canela

Blanco 1

4.50mL

0.00mL

0.30mL

0.20mL

0.00mL

Blanco 2

4.30mL

0.00mL

0.30mL

0.20mL

0.20mL

1

4.40mL

0.30mL

0.30mL

0.20mL

0.00mL

2

4.30mL

0.30mL

0.30mL

0.00mL

0.20mL

3

4.20mL

0.30mL

0.30mL

0.20mL

0.20mL

Resultados

Celda

0

3

6

9

12

15

18

21

24

27

30

B1

99.0%