Fraccionamiento Celular INTRODUCCIÓN

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A + Acetocarmín

Observaciones: Tras realizar una centrifugación diferencial a diferentes velocidades y tiempos en cada tubo de ensaye, se logró observar organelos como: núcleo, membrana celular y algunos cloroplastos en los diferentes precipitados que se fueron formando, obteniendo así a velocidad de 1500 rpm el núcleo y la membrana celular, mientras que en la velocidad de 3500 rpm se obtuvieron los cloroplastos, esto se debe a la densidad que presenta cada organelo.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Para llevar a cabo la práctica de fraccionamiento celular en una muestra de espinaca,se realizó una homogeneización en las hojas de espinaca con ayuda de un mortero, utilizando con disolvente PBS el cual se emplea como vehículo neutro para células, ya que no modifica el perfil de expresión y funcionamiento celular normal, debido a esto, el uso de esta solución es muy común para lavar células a través de la centrifugación. Al realizar este procedimiento se logra que las células se compriman y liberen su contenido celular.

Seguido de esto se filtró el contenido mediante el uso de gasas con la finalidad de eliminar lo que no se deseaba observar en las muestras, sometiendo el filtrado a centrifugaciones de diferentes velocidades y tiempos,para que de esta manera se lograrán separar los componentes de la célula en función de su tamaño y densidad, haciendo que los componentes más densos migraran más rápidamente hasta el fondo y formaran un sedimento, obteniendo de esta manera las fracciones celulares.

A algunos de los tubos se les añadió 0.5 ml de urea la cual tiene como principal función penetrar la membrana lipídica , inflando así los organelos para lograr una mejor observación al colocar las muestras en el microscopio

Para finalizar con ayuda de una pipeta pasteur se coloco por separado una muestra de cada tubo de ensaye en un portaobjeto tapandolo con un cubreobjeto, logrando así observar en un enfoque de 40x organelos como el núcleo, la membrana celular y algunos cloroplastos. Es importante mencionar que en una de nuestra muestras se utilizó acetocarmín el cual es un colorante natural , el cual ayuda en la tinción de los diferentes organelos para crear así un contraste en el microscopio ayudando a hacer más visibles los organelos

Tras comparar nuestros resultados con la parte teórica nos dimos cuenta que el núcleo y la membrana son los primeros organelos en aparecer después de realizar una centrifugación a la muestra,esto debido a la densidad y tamaño que presentan ya que son los organelos de mayor densidad y tamaño , mientras que los cloroplastos al tener una menor densidad se logran observar al realizar una centrifugación de mayor velocidad.

CONCLUSIÓN

A través de esta práctica se logró comprender y aplicar los procedimientos adecuados para realizar una centrifugación para poder estudiar las estructuras celulares haciendo posible un mejor estudio y enfoque, cuando la estructuras celulares se encuentran en fracciones aislados de los demás organelos celulares.