INFORME LABORATORIO N°1 “APRENDIENDO A USAR EL MICROSCOPIO Y MICROPIPETAS”

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cada solución a una longitud de onda de 560 nm.

DESARROLLO EXPERIMENTAL

Al comienzo de la actividad se observó bajo el microscopio cada portaobjetos con su respectiva letra. Primero se utilizó el objetivo 10X con el cual fue necesario realizar una elevación de la platina con la cremallera para acercar el objeto al objetivo. Posteriormente se manipularon las perillas coaxiales para desplazar la platina y centrar el portaobjetos en el objetivo. Finalmente se accionaron los tornillos de enfoque macro y micrométrico para lograr la resolución deseada (Fig.1). A continuación se procedió a girar el revólver en dirección de las manecillas del reloj y se acomodo en el objetivo 20X, con el cual el campo visual se redujo, debido a esto, se desplazó la platina con las perillas de movimiento x-y para observar la letra en su totalidad. El aumento y la resolución mejoraron evidentemente (como se observa en la Fig.2).

Por último se observó la letra a través del objetivo 40X, con el cual el campo visual se redujo aún más pero se logró una mayor resolución respecto al objetivo 20X (Fig.3).

(Fig.1) (Fig.2) (Fig.3)

foto letra 40X.jpg foto letra 10 X.jpg foto letra 20X.jpg

Fig.1 corresponde a la letra observada con el objetivo 10X. Fig.2 corresponde a la letra observada con el objetivo 20X. Fig.3 corresponde a la letra observada con el objetivo 40X.

En la segunda parte del trabajo práctico se realizó un frotis de mucosa oral, se dispuso la muestra en un portaobjetos y luego se cubrió con un cubreobjetos para posteriormente ser observada bajo el microscopio. De la misma manera que con las letras, la muestra se examinó con tres objetivos diferentes, 10X, 20X y 40X. Al momento de observar la muestra a través del microscopio no se logró percibir ninguna estructura definida con ninguno de los objetivos, debido a la transparencia de la mucosa oral. En vista de lo mencionado, se procedió a teñir la muestra con azul de metileno, el cual delimitó instantáneamente cada una de las estructuras que componían la muestra. Se cubrió nuevamente con un cubreobjetos y se acomodo en la platina con el revólver ubicado en el objetivo 10X, éste permitió visualizar los límites y algunas burbujas de aire que había en la muestra (Fig.4) pero no se logró identificar ninguna estructura celular.

Posteriormente se giró el revólver para acomodar el objetivo 20X. Del mismo modo en que ocurrió con las letras, el campo visual se redujo y se utilizó las perillas de movimiento x-y para abarcar toda la muestra. El aumento y la resolución mejoraron de tal manera que fue posible observar estructuras celulares con sus respectivos núcleos definidos (como se observa en la Fig.5).

Finalmente, la muestra se examinó bajo el objetivo 40X y se logró, a pesar de su elevado aumento, una excelente resolución que posibilitó, además de ver las células y sus núcleos perfectamente delimitados, observar minúsculas estructuras dentro de cada una de ellas, las cuales se pudieron considerar como otros organelos subcelulares(Fig.6). Debido al aumento de este objetivo, el campo visual se redujo bastante y fue necesario mover la platina para examinar la muestra en su totalidad.

(Fig.4) (Fig.5) (Fig.6)

Fig.4 corresponde a mucosa oral observada con el objetivo 10X. Fig.5 corresponde a mucosa oral observada con el objetivo 20X. Fig.6 corresponde a mucosa oral observada con el objetivo 40X. foto mucosa 20X.jpg foto mucosa 10X definitiva.jpg foto mucosa 40X definitiva.jpg foto mucosa 20X 2.jpg

En la tercera parte del trabajo práctico se preparó 6 soluciones con diferentes concentraciones de agua destilada (H2Od) y Rojo Fenol. Cada una de las soluciones se preparó en tubos eppendorf, con la ayuda de las micropipetas P1000 y/o P200. La primera solución constó de 1000µL de H2Od, se configuró la micropipeta P1000 en el volumen de 1000µL y se procedió a extraer el contenido de h2Od de una botella y posteriormente se depositó en un tubo eppendorf. La segunda solución se preparó con 900µL de H2Od, extraídos con la micropipeta P1000 configurada en el volumen adecuado, y se dispusieron en otro tubo eppendorf, seguidamente se extrajo 100µL de Rojo Fenol, con la micropipeta P200 configurada en el volumen mencionado, de un tubo de ensayo plastico y luego se depositó dentro del mismo tubo eppendorf en donde se encontraban los 900µL de H2Od. La mezcla de ambos dentro del tubo eppendorf se realizó con la micropipeta P1000. La tercera solución se realizó solo con la micropipeta P1000 y para ello se mezclaron en un tubo eppendorf 700µL de H2Od y 300µL de Rojo Fenol. Para la cuarta solución al igual que la tercera se utilizó solo la micropipeta P1000 pero con concentraciones de 500µL de H2Od y 500µL de Rojo Fenol, la solución se depositó en otro tubo eppendorf, se mezcló y se reservó junto a las otras. La quinta solución constó de 250µL de H2Od y 750µL de Rojo Fenol, también se preparó y mezcló en un tubo eppendorf con la micropipeta P1000. Finalmente para la sexta y última solución, se extrajo 1000µL de Rojo Fenol del tubo de ensayo plastico y se depositó en otro tubo eppendorf con la micropipeta P1000.