LEUCEMIA MIELOIDE.

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PREGUNTAS

- ¿Cómo puede uno determinar si esta malignidad linfoide está relacionado con la malignidad mieloide identificado en la presentación inicial?

Para determinar la relación , sería necesario probar que las células linfoides son clonal y que tanto el mieloides y células linfoides son parte del mismo clon .

6 - CML, fase blástica - análisis de citometría de flujo

Una muestra de sangre periférica del paciente se tiñó con anticuerpos para el CD19, CD10 y kappa de inmunoglobulina y las moléculas de la superficie celular lambda. En una muestra separada, se hicieron permeable a las células y se tiñeron con anticuerpos contra CD22 intracelular y desoxinucleotidil transferasa terminal (TdT). La población predominante, representado en rojo, corresponde a la población de las células malignas.

- Sobre la base de este patrón de tinción, qué tipo de célula es ahora la población predominante?

Las células expresan la sartén de células B CD19 y CD22 marcadores . Sin embargo, también expresan CD10 y TdT , que se encuentra en las células B inmaduras ; TdT no se observa en células B maduras . Además, las células no expresan la cadena ligera kappa o lambda en su superficie ( es decir, son inmunoglobulina de superficie negativa). Este material compuesto de marcadores es característica de las células B inmaduras (células pre- B).

- ¿Cómo se puede determinar si una proliferación de las células B es clonal de origen?

Esto se puede lograr mediante el ensayo para la presencia de un reordenamiento de genes de inmunoglobulina único en las células.

- Qué tipo de célula se representa en negro?

Las células representadas en negro son CD19 + , CD22 + , CD10- , TdT- , y lambda o kappa de cadena positiva. Este es el fenotipo de las células B maduras .

7 - CML, fase blástica – Cariotipo

Análisis cariotípico de células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de la segunda presentación revela que, aunque las células tienen una morfología linfoide, que todavía contienen la t (9; 22) translocación de CML. Además, se han adquirido varias nuevas anomalías cromosómicas: copias adicionales de los cromosomas # 8, # 10 y # 19 y una segunda copia del cromosoma anormal # 22 (el cromosoma Filadelfia).

- ¿Cuál es la importancia de este tipo de leucemia linfoide cromosoma Filadelfia positivo?

La presencia del cromosoma Filadelfia en estas células linfoides sugiere que las células en esta etapa posterior de la enfermedad son parte del mismo clon que dio lugar a células mieloides. Por lo tanto, la célula original transformada en este leucemia era una célula madre pluripotente que produjo las células mieloides anormales en la primera fase de la enfermedad . Posteriormente , parece que las mutaciones adicionales afectados B de células del linaje linfoide anormal ( s) a partir del clon maligno , que luego progresó para producir la fase de explosión.

- ¿Cuál es el significado de las anomalías cromosómicas adicionales observados en la segunda presentación?

La presencia de anomalías cromosómicas adicionales significa inestabilidad genómica y la progresión de la malignidad .

8 - La restricción (enzima) mapa de BCR y ABL loci, normal y reordenado – Esquema

Los BCR y ABL loci se encuentran en los cromosomas humanos 22 y 9, respectivamente. Como resultado de la t (9; 22) de translocación observado citogenéticamente en> 90% de los casos de CML, la parte telomérica (tel) de la ABL locus se fusiona a la parte centromérica (CEN) de la BCR locus, la generación de la Philadelphia cromosoma (Ph). La transposición de los nodos de la BCR clúster locus en el medio telomérica de un fragmento de la enzima de restricción BglII de 5,8 kb. Una sonda de hibridación (negro sólido) para una secuencia de ADN situada en el medio centromérica de este fragmento BglII puede demostrar células portadoras de este translocación en muestras de sangre periférica por la presencia de un nuevo fragmento en el análisis de transferencia de Southern; en este ejemplo, la novela fragmento sería más corto que el fragmento del cromosoma normal. Tenga en cuenta que el producto inverso de la translocación no es detectado por esta sonda.

PREGUNTAS

- ¿Cómo sería el tamaño de la hibridación de bandas de cambio en el ADN digerido con XbaI?

La banda de hibridación sería más grande, debido a la separación más amplia de los sitios Xba1 en el cromosoma translocado .

9 - BCR en el ADN genómico de CML - análisis de transferencia Southern

La imagen muestra un análisis de Southern blot de ADN periférica de células mononucleares de la sangre (PBMC) de un (columna C) paciente control normal y del paciente CML durante la presentación inicial (primera columna de Pt) y la segunda presentación (segunda columna Pt) digerido con las enzimas de restricción XbaI o BglII. (La columna MW muestra fragmentos de ADN de longitud estándar y el peso molecular.)

PREGUNTAS

- ¿Por qué se observaron dos bandas en las muestras de la paciente?

Hay dos bandas porque sólo un alelo se reordena BCR ; el otro alelo , que no se reordena , produce la banda de la línea germinal .

- Dado que las células de la CML original y la fase blástica linfoide llevan la misma alteración genética, lo que es la naturaleza del tipo de células que se transformó originalmente?

Esto implica que el clon maligno de las células mieloides y el clon maligno de las células linfoides observados en fase blástica surgieron de la misma célula - una célula madre pluripotente.

10. estructura exón del BCR, ABL, y genes / ABL BCR - - 10 Esquema

Esta imagen muestra la estructura de los normales ABL y BCR genes y del gen de fusión (BCR / ABL) generado en el cromosoma Philadelphia, como resultado de la t (9; 22) (no dibujado a escala). Las cajas corresponden a los exones, que se unen entre sí en el ARNm como resultado de empalme de ARN. La principal