La presente practica de laboratorio consiste en observar las reacciones enzimáticas del almidón en la digestión por las amilasas, pero primero definiremos la amilasa.
Enviado por tomas • 6 de Abril de 2018 • 2.492 Palabras (10 Páginas) • 632 Visitas
...
Luego se debe colocar en 2 reactivos:
Reaccion con Lugol
TUBOS
1
2
3
Digerido 1 mL
1,0
-
-
Digerido 2mL
-
1,0
-
Digerido 3 mL
-
-
1,0
HCl 0,5 N mL
0,2
0,2
0,2
Solucion de Lugol mL
1,0
1,0
1,0
Para este caso si había presencia de sustrato (Almidon) existía coloración Azul, pero si no significaba la falta d Almidon
Reaccion con Benedict[pic 4]
TUBOS
1
2
3
Digerido 1 mL
0,5
-
-
Digerido 2mL
-
0,5
-
Digerido 3 mL
-
-
0,5
Reactivo de Benedict mL
1.0
1.0
1.0
Para este caso si había presencia de producto se formaba un precipitado color rojo ladrillo, pero si no significaba que no hubo reacción. Cabe recordar de que en el reactivo de Benedict se debe calentar a 100ºC en baño Maria para poder lograr la coloración. [pic 5]
CONCLUSIONES
Con los resultados obtenidos en nuestra mesa nos dan a entender que hubo errores en ciertos pasos de la preparación que pasaremos a detallar a continuación:
En nuestra batería ocurrió lo siguiente:
Como podemos apreciar el lugol da positivo para el tubo 1 y 2, y benedict da negativo para el tubo 1 y 2. [pic 6]
TUBOS
1
2
3
LUGOL
+
+
+
BENEDICT
-
-
-
Pero en general, nos hubiera dado esta forma:
TUBOS
1
2
3
LUGOL
-
-
+
BENEDICT
+
+
-
Con ello nos demostraría la actividad enzimática a un pH óptimo alcalino y no a un pH acido, como ya se mencionó, debido a la inactivación de la enzima.[pic 7]
DISCUSION DE RESULTADOS
Respecto a la reacción con el Lugol, se sabe por teoría que el lugol reacciona con el almidón adhiriéndose y tornando una solución de color azul violeta. Es por ello que el tubo 1 y el tubo 2 al haber sido sometidos a la acción de la enzima no tuvieron que reaccionar con el lugol, pues en esos tubos ya no había almidón, solo quedaba “dextrinas”. Sin embargo estos tubos reaccionaron.
Con el reactivo de Benedict nos sucedió lo mismo. El reactivo de Benedict reacciona con azucares reductores que en este caso sería el producto de la reacción con la amilasa y el almidón. Sin embargo no reacción en los tubos 1 y 2.
En ambos casos se observa que en todos los tubos solo hay almidón. Esto nos llevó a pensar en dos motivos para dichos resultados. El primero es que la saliva hubiera estado muy diluida de tal manera que no pudo degradar al almidón. El otro motivo es que a la hora de pipetear la enzima o saliva diluida lo hayamos hecho con la misma pipeta que utilizamos para el HCl de tal manera que la enzima se haya desnaturalizado por efecto del pH.
CUESTIONARIOS:
1.- Calcule el pH del tubo 3 de la experiencia
[pic 8]
[pic 9]
[pic 10]
[pic 11]
2.- Cuales hubieran sido los resultados si el donante de saliva hubiera ingerido alimentos y no hubiera realizado un buen enjuague bucal al colectar la saliva? Explique
En la reacción con el lugol todos habrían presentado color amarillo, característico del lugol. Quizá el tubo 3 haya reaccionado un poquito, pero no mucho. En la reacción con Benedict todos habrían presentado precipitado rojo ladrillo en distintos grados. Es decir, el tubo 1 hubiera presentado mucho precipitado; el tubo 2, regular cantidad y el tubo 3, poca cantidad. Esto se debe a que ya hay productos en la muestra. El motivo es que en su boca la amilasa a reaccionado con el almidón
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