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Laboratotio enzima catalasa.

Enviado por   •  16 de Febrero de 2018  •  1.173 Palabras (5 Páginas)  •  720 Visitas

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...

Tubo No

Condicion

1

En agua hirviendo por 15 minutos

2

En baño maría a 37oC por 10 minutos

3

Temperatura ambiente

4

Congelador por 45 minutos

Cuando cada tubo esté listo, agregar 2 ml de agua oxigenada a cada tubo después del tiempo estipulado, y con el cronómetro en mano registrar el tiempo cero al momento de agregar el sustrato y el tiempo transcurrido entre la adición del agua oxigenada y la aparición de burbujas. Anote las observaciones.

- Efecto del pH

Coja tres tubos de ensayo e introduzca 2 ml de extracto de papa o de espinaca. Rotular cada tubo en secuencia como 1, 2, 3 y adiciones reactivos de la manera como se indica en la siguiente tabla:

Tubo No

Adición

1

3ml de NaON 3M

2

3ml de HCl 3M

3

3 ml buffer Fosfato

Agite cada tubo suavemente e introduzca 3 ml de peróxido de hidrógeno a cada uno. Deje en la gradilla y observe los resultados. Anote sus observaciones.

- Comparación de la actividad de la enzima y de un catalizador inorgánico.

Coja 7 tubos de ensayo limpios y secos, rotúlelos e introduzca en cada uno los reactivos según la siguiente tabla:

TUBOS

REACTIVOS

1

2

3

4

5

6

7

trozo de papa o espinaca

1

----

---

---

---

1

----

H2O2 5% (gotas)

10

10

10

10

10

10

10

Extracto papa hervida (ml)

---

1

---

---

---

---

----

Cloruro de mercurio (ml)

---

---

1

---

---

---

---

Extracto ez papa o espinaca

---

---

1

---

---

---

1

MnO2 (gr)

---

---

---

0,01

0,01 **

0,01

---

**: este tubo (No5) se debe calentar con el dióxido de manganeso, para después enfriarlo antes de adicionarle el agua oxigenada.

- Determinación del carácter exotérmico de la reacción catalizada por la catalasa.

Realice el montaje como se indica en el esquema, de la siguiente manera: a un tubo de ensayo colocado en el extremo de una gradilla, agréguele 2 ml de extracto enzimático de papa o espinaca, e introdúzcale el termómetro de manera que quede visible la escala de medición dentro del tubo. Tome la temperatura inicial. Agregue 2 ml de agua oxigenada del 5% y empiece a observar la temperatura cada 30 segundos. Anote la temperatura hasta los 5 minutos. Haga una gráfica. Explique las variaciones de temperatura.

- CUESTIONARIO

- Averigue cuál es la estructura tridimensional de la catalasa. Explíquela

- Explique cómo es el mecanismo de reacción de la enzima y a que grupo y subgrupo pertenece en cuanto a clasificación.

- De acuerdo con lo experimentado cuales son los factores que afectan la actividad de las enzimas, y cómo lo hacen.

- Consulte sobre los catalizadores inorgánicos y establezca dos diferencias en cuanto a las enzimas

- . Cuales son la temperatura y el pH óptimo de la catalasa en cuanto a su actividad enzimática

- En que compartimento celular de las células vegetales se encuentra la catalasa y cuál es su función fisiológica y metabólica.

(Basado en Prácticas de Biología General. Cecilia Bacca et al. Universidad INCCA)

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