Manual de Prácticas para el Laboratorio de Microbiología y Parasitología

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Sistema de lentes, consta de los oculares (lentes por donde se mira); objetivos, conjunto de lentes con distintos aumentos.

Sistema mecánico, está integrado por base o pie; tubo portaocular; brazo; platina (base en la cual se fija la laminilla); tornillos de enfoque, macrometrico (avance rápido) y micrométrico (avance lento); revólver. En la figura 1 se pueden apreciar los tres sistemas descritos anteriormente.

[pic 2]

Figura 1. Representación gráfica de los constituyentes del microscopio óptico.

Antecedentes

Hipótesis

El correcto manejo de los tres sistemas del microscopio óptico permite la observación detallada en muestras de agua de pantano.

Objetivo

Conocer el uso adecuado del microscopio óptico durante la observación de una muestra de agua de pantano.

Material

- Muestra de agua de pantano

- 1 micropipeta

- Puntas para micropipeta

- Portaobjetos

- Cubreobjetos

- Microscopio óptico

Procedimiento

- Preparar el portaobjetos limpiándolo con papel arroz con la intención de eliminar partículas de polvo o grasa sobre su superficie.

- Tomar aproximadamente 2µl de la muestra de agua de pantano con la micropipeta y colocarlo sobre el portaobjetos.

- Colocar el cubreobjetos sobre la muestra con la intensión de expandirla uniformemente.

- Fijar la preparación a la platina e iniciar a enfocar con el objetivo 10x un campo de observación (espacio físico en el portaobjetos que contiene a la muestra y en el cual incide la fuente de iluminación).

- Identificado un campo pasar al objetivo de 40x y observar en forma de zig-zag.

- Realizar las observaciones pertinentes.

- Concluidas las observaciones, apagar el sistema de iluminación.

- Retirar la preparación y limpiar el objetivo con papel arroz si por algún motivo este se manchó con material de la laminilla observada.

- Los residuos se depositan en los contenedores diseñados para tal fin.

Resultados

Discusión

Conclusión

La correcta identificación de los constituyentes del sistema mecánico asociado al óptico y de iluminación y la manipulación exacta permite realizar observaciones con un alto grado de confiabilidad.

Literatura Recomendada

- Vázquez, C.; Martín, A.; Silóniz, Ma. I. y Serrano, S. 2010. Técnicas básicas de microbiología. Observación de bacterias. Serie microbiología, 3(5): 15-38.

Practica número 2. Preparación y esterilización de medios de cultivo.

Introducción

La disponibilidad de carbono como fuente de energía es un factor que determina el crecimiento de los microorganismos. En microbiología se utilizan diferentes tipos de medios de cultivo, que proporcionan las condiciones físicas, químicas y nutritivas adecuadas para estimular el desarrollo y aislamiento de microorganismos patógenos para el hombre. Hay una serie de clasificaciones establecida para los medios de cultivo1, entre estas podemos encontrar los de tipo líquidos, semisólidos y sólidos.

Los medios solidos permiten la obtención de colonias aisladas de microorganismos, además de que constituyen la mayor parte de los medios de cultivo que se emplean en el laboratorio de microbiología. De igual forma estos medios van a permitir con base en su composición analizar un conjunto de aspectos propios de los microorganismos que podrán ser útiles para su identificación.

Los diferentes medios de cultivo poseen los nutrientes necesarios para el crecimiento de los microorganismos por lo que es de vital importancia prepararlos en condiciones asépticas, para así evitar que se contaminen con microorganismos del ambiente. Estas condiciones solo pueden ser logradas mediante el uso de métodos de esterilización, los cuales se dividen en: esterilizantes físicos (calor húmedo y seco, rayos ultravioleta, radiación ionizante, etc.), esterilizantes químicos (ácido paracético, glutaraldehído). En el laboratorio de microbiología se esteriliza con uno de los procedimientos físicos, específicamente con calor húmedo.

Antecedentes

Hipótesis

El estricto control en la preparación y esterilización de los medios de cultivos permite la producción de medios solidos axenicos.

Objetivo

Conocer el método de preparación y esterilización adecuado en la producción de medios solidos axenicos.

Material

- Contenedor de plástico

- Espátula

- Medio de cultivo

- Balanza analítica

- Baso de precipitado

- Probeta graduada

- Matraz Erlenhmeyer

- Filtro de algodón

- Agua destilada

- Parrilla eléctrica

- Guantes térmicos

- Autoclave

- 15 ml de sangre desfibrinada

- Placas de Petri

- Mecheros Bunsen

Procedimiento

- Desinfectar el área de trabajo con fenol al 5% o alcohol antes de iniciar la práctica.

- Leer las instrucciones del fabricante para cada medio de cultivo y pesar en la balanza analítica la cantidad de medio