OBTENCIÓN DE ANTOCIANINAS DE REPOLLO MORADO (Brassica oleracea var. capitata f.) MEDIANTE EXTRACCIÓN SOXHLET Y SEPARACIÓN DE METABOLITOS POR CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA

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El interés por los pigmentos antociánicos e investigación científica se han incrementado en los últimos años, debido no solamente al color que confieren a los productos que las contienen sino a su probable papel en la reducción de las enfermedades coronarias, cáncer, diabetes; a sus efectos antiinflamatorios y mejoramiento de la agudeza visual y comportamiento cognitivo. Por lo tanto, además de su papel funcional como colorantes, las antocianinas son agentes potenciales en la obtención de productos con valor agregado para el consumo humano. [7]

El aumento de la producción de oxidantes en los seres humanos induce una serie de consecuencias trombóticas; incluyendo plaquetas hiperactividad / agregabilidad, lo que podría ser contrarrestado a través de los alimentos funcionales desarrollados específicamente. Por lo que se ha tratado de determinar las propiedades antitrombóticas de jugo de ciruela Reina Granate (QGPJ) suplementación antocianina ricos con y sin el estrés oxidativo inducido por el ejercicio. [8]

- Metodología Propuesta

- Obtención de colorantes

[pic 3]

Diagrama. 1: Metodología para la obtención de colorantes mediante extracción soxhlet

- Cromatografía de capa fina.

Se realizaron varias pruebas de error ensayo, hasta lograr un resultado, donde la capa sea la adecuada para que el metabolito de interés suba por capilaridad y nos arroje el valor deseado.

[pic 4]

Diagrama. 2: Separación de metabolitos por cromatografía de capa fina

- Resultados

- Rendimiento

[pic 5]

[pic 6]

[pic 7]

- Obtención de colorantes vegetales mediante extracción Soxhlet

Tabla 1: Reporte de datos del extracto

Muestra inicial

13.9193g + 39 ml de etanol

Extracto

7.46g

Rendimiento

53,59%

Tabla 2: Reporte de pH

pH

Resultado

pH

Resultado

12

[pic 8]

4,5

[pic 9]

8,8

[pic 10]

2,9

[pic 11]

- Separación de metabolitos por cromatografía de capa fina

[pic 12]

Tabla 3: Reporte de cromatografía de capa delgada

Rf

Resultado

No se revelo la muestra de cromatografía de capa delgada, he incluso agregándole el roció del permanganato de potasio y llevándolo a 60ºC

[pic 13]

Cromatografía en capa fina, vista al visible de la subespecie Brassica oleracea var. capitata f. (repollo morado). (MOYANO, 2015)

[pic 14]

- Análisis de Resultados

- Rendimiento

Como lo muestra la “Tabla 1” el rendimiento del producto obtenido fue de 53,59%, esto quiere decir que por cada kilogramo de material empleado se obtendrá un poco mas de la mitad de extracto o 60%, también nos indica que el método de extracción Soxhlet tiene una eficiencia alrededor del 60%

- Obtencion de colorantes vegetales mediante extracion Soxhlet

En la “Tabla 2” se puede evidenciar, el cambio de pH, que incide en la coloración de la antocianina, estas variaciones observadas corresponden al comportamiento de los pigmentos antociánicos, los cuales sufren transformaciones estructurales reversibles en condiciones ácidas o básicas. [7]

El pH tiene efecto en la estructura y la estabilidad de las antocianinas. [10] Para el extracto obtenido de repollo (Brassica oleracea var. capitata f.) con etanol como solvente, se observan en la “Tabla 1” donde se obtuvieron para la primera muestra un pH 12 de coloración amarilla; según “Garzon. G. 2008” nos indica que a pH superiores a siete se presentan las formas quinoidales (A, A-), se degradan rápidamente por oxidación con el air. Esto también sucede para la segunda muestra donde el resultado fue de pH 8.8, estos resultados es típico para los colores purpura. [9] Se observa en la “tabla 2” que se tiene un pH 4,5 en la tercera muestra, esto a consecuencia de que hay una pérdida del protón, dando lugar a un equilibrio entre la pseudobase carbinol o hemicetal (B) y la forma chalcona (C), o de cadena abierta. Tanto el hemicetal como la chalcona, son formas incoloras y bastante inestables. [10][11] Finalmente podemos observar en la “Tabla 2” en la muestra cuatro donde se obtuvo un pH de 2,9 de color rosado, consecuentemente se pude decir lo mismo ya que este patrón se presenta para pH mayores a 2. Para pH 1 en algunas ocasiones las coloraciones son de rojo intenso, indica básicamente, que el 100% del pigmento se encuentra en su forma más estable o de ión oxonio o catión flavilio (AH+), el cual no se detectó durante la experimentación.

- Separacion de metabolitos por cromatografía de capa fina

Como se observa en la “Tabla 3” figura 1, no se revelo la muestra de cromatografía de capa delgada, he incluso agregándole el roció del permanganato de potasio y llevándolo a 60ºC durante 5 minutos.

Se consultó la literatura de la subespecie Brassica oleracea var. capitata f. (repollo morado) donde por método de cromatografía de capa fina, utilizaron extracto de repollo morado en una solución de hidróxido de sodio y utilizando