PRÁCTICO N°6 Metabolismo de Carbohidratos.

...

2. Agite por inversión para homogenizar el contenido de cada tubo.

3. Tape cada tubo herméticamente con papel parafilm. Marque el nivel de la solución en cada tubo y amarre con un elástico los 4 tubos. Incube en un baño termorregulado a 43°C.

4. Al cabo de 30 minutos marque el nivel final de la solución en cada tubo y mida el volumen de gas producido con una pipeta con agua.

5. Verifique el pH en el tubo 2 con papel pH.

6. Anote y discuta sus resultados. ¿Qué debería ocurrir en cada tubo?

7. Busque y anote la estructura de la glucosa y determine sus características.

8. Investigue para qué se utiliza el NaF y la solución rojo neutro en esta actividad.

9. Investigue qué sucede con el CO2 cuando pasa a la fase acuosa.

B. Velocidad de Fermentación.

Soluciones y materiales:

- Solución de levadura 10%(p/v)

- Solución de glucosa 10% (p/v)

- Solución de sacarosa 10% (p/v)

- Solución de azul de bromotimol

- Agua destilada

- Cronómetro

- Baño termorregulado a 43°C

- Trozo de manguera flexible

- Papel parafilm.

- Dos tubos de ensayo

1.- Tomar dos tubos de ensayo. En el primer tubo adicionar 5 ml de sacarosa al 10% y 1 ml de cultivo de levaduras al 10%; y en el segundo tubo adicionar 1ml de Azul de Bromotimol diluido en 4 ml de agua destilada. Sumergir ambos tubos en baño a 43ºC.

2.- Conectar ambos tubos de ensayo con una manguera flexible, teniendo la precaución de dejar la manguera sumergida en la solución de Azul Bromotimol. Sellar bien cada tubo con Parafilm para evitar la fuga de gas.

3.- Cuando comience la reacción de fermentación, el producto gaseoso burbujeará en la solución indicadora, por lo que Azul de Bromotimol, cambiará a un color amarillo-ocre.

4.- Tomar el tiempo que demora el azul de bromotimol en que cambie su color original a amarillo ocre, considerando que la reacción comienza inmediatamente después de colocar tubos en baño termorregulado a 43°C y sellar ambos tubos.

5.- En paralelo, otro grupo realice el mismo experimento cambiando la sacarosa por glucosa al 10%.

6.- Comparta los resultados obtenidos con sus compañeros y analice.

7.- Investigue por qué cambia el color de la solución de azul de bromotimol ¿cuál es la finalidad de esta solución en esta reacción?.

ANEXO (revisar estas preguntas previo al práctico).

1.- Si en ambas experiencias experimentales está analizando el proceso de fermentación:

a) Esquematice la reacción exacta del metabolismo anaeróbico realizado por la levadura (glicólisis y fermentación).

b) ¿Cuál es la finalidad del proceso de fermentación?.

c) ¿La fermentación corresponde a un proceso catabólico o anabólico?. Fundamente.

d) Respecto a la actividad A: ¿cuál de todos los tubos analizados genera en forma adecuada fermentación y porqué?.

e) Respecto a la actividad B: ¿cuál es la reacción más rápida de fermentación ya sea utilizando glucosa o sacarosa y porqué?.

ESTE LABORATORIO SERÁ EVALUADO CON QUIZ DE ENTRADA (NOTA QUIZ) Y QUIZ DE SALIDA (equivalente a NOTA INFORME).