Practicas de imunidad.

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FUNDAMENTO En 1930 se observó que la reacción que se origina en el suero de pacientes que sufren de enfermedades inflamatorias precipita con un extracto de pneumococo no proteico llamado polisacárido C. La proteína que causa este tipo de reacción fue llamada Proteína C Reactiva.

Como un fenómeno no específico el incremento en la concentración de PCR se puede presentar en cualquier proceso inflamatorio agudo ( ya sea infecciosos o no infeccioso).

El principio del procedimineto presentado involucra una reacción inmunológica entre la PCR (como antígeno) y el anticuerpo correspondiente adsorbido a las partículas de látex.

TÉCNICA

Método cualitativo

El látex anti-PCR debe estar a temperatura ambiente antes de ser utilizado.

- Hacer una dilución 1:20 del suero con la solución diluyente.

- Despositar 0.05 ml del suero dliuluido en una palaca de aglutinación.

- En otro espacio de la placa colocar una gota del control positivo y en otro el control negativo.

- Añadir a cada uno de los 3 espacios una gota del látex.

- Mezclar manualmente la placa de reacción durante 2 minutos y leer los resultados.

Interpretación

Resultado positivo: hay presencia de agregados macroscópicos o aglutinación.

Resultado negativo: no hay presencia de aglutinación.

Método semicuantitativo

- Colocar en una gradilla 5 tubos y numerarlos

- Depositar al tubo 1 0.95 ml del diluyente al igual que en los otros tubos.

- Añadir al tubo al tubo 1 0.05 ml del suero problema positivo. Mexcle.

- Pasar 0.05 ml del tubo 1 al tubo 2 y mezclar; y así sucesivamente para cada tubo.

- Depositar 0.05ml de cada una de las diluciones en áreas diferentes de la placa.

- Añadir una gota del reactivo látex a cada una de las diluciones del suero en las áreas de la placa.

- Mezclar manualmente la placa de reacción durante 2 minutos.

- Leer los resultados.

Interpretación

El título del suero probelma será la última dilución que presente agregados macroscópicos.

Limitaciones del método.

- No deben utilizarse suero turbios, hemolizados o contaminados para realizar la prueba.

- Para evitar falsos resultados NO es recomendable realizar la lectura después de los 2 minutos.

CUESTIONARIO

- Escribe el nombre de 5 enfermedades que dan positiva la prueba de la PCR.

PRACTICA 2

DETERMINACION DEL VDRL

OBJETIVO

Realizara la determinación del VDRL

FUNDAMENTO

La prueba del VDRI, es una prueba cualitativa y cuantitativa en placa por floculación para la detección de anticuerpos contra el 'I'reponema paliduim. La mayoría de las pruebas entra en 2 categorías. Pruebas no troponemales y treponemales.

Las pruebas no treponemales incluyen precipitación, floculación y combinación de métodos.

Complementarios que utilizan antígenos derivados de una extracción animal por ejemplo la cardiolipina, lecitina o colesterol en solución de alcohol . Las pruebas treponemales incluye aglutinación, anticuerpos fluorescentes. Inmovilización de 'I'reponemas y combinación de métodos que utilizan anfígenos de filtraciones de 'I'reponema palidum virulentos

TÉCNICA

- Poner los reactivos a tmeperatura ambiente antes de iniciar la técnica.

- Reacción Cualitativa

- Colocar 30 microlitros de suero o plasma en el espacio de problema.

- Colocar 30 microlitros de suero control positivo en el área de control positivo y 30 microlitros de solución salina en el control negativo.

- Agregar una gota de látex a cada área. Mezclar por 6 minutos y observar al microscopio.

Reacción positiva:Aglutinación

CUESTIONARIO

- Qué significa la sigla VDRL

- Escribe el nombre del agente etiológico que produce la sífilis.

- Qué es la cardiolipina

- Escribe la sintomatología de la sífilis

- Cuál es el tratamiento de la sífilis.

PRACTICA 7

PRUEBA DE EMBARAZO

OBJETIVO

Determinara cualitativamente la HGC en orina o suero.

FUNDAMENTO

La HGC es una hormona glicoproteica sintetizada por la placenta detectable en sangre y orina de manera temprana después de la inplantación de un ovulo fertilizado en el tejido corionico.

El uso de anticuerpos monoclonales en la subunidad beta de HGC es un inmunoensayo nos da especificidad consistente y, alta sensibilidad.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA: La membrana de nitrocelulosa es impregnada con IgG chivo-antiraton en la zona de control y anticuerpo chivo anti-HGC ' en la zona de test. Durante la prueba. la orina o suero es absorbida por el cojín en la zona donde se coloca la muestra en la prueba por fenómeno de accion capilar y la hormona HGC en la muestra de orina se combina con el oro coloidal, moviendose cromatograficamente a lo largo de la membrana. El anticuerpo chivo anti-HGC preimpregnado en la zona de test atrapa el complejo restultante. La