Reconocimiento de Carbohidratos, lípidos y proteínas. Introducción.

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Observación microscópica de gránulos de almidón

[pic 1]

[pic 2]

Gránulos de almidón (amioplastos)

Figura N° 1: Observación de corte de tubérculo de papa.

Objetivo: (40X)

Material: Corte delgado de grasa animal.

Método: Reactivo Sudán IV

Aumento: (40X)

Observaciones: Se observó los gránulos de almidón presentes en el tubérculo de papa.

Identificación de lípidos.

En el tubo, en un principio reaccionó inmediatamente tiñendo el agua y el aceite de color rojo. Al cabo de los 5 minutos de reposo se observa el precipitado de color rojo intenso.

Observación microscópica de tejido adiposo.

[pic 3]

Adipocitos [pic 4]

Figura N° 2: Observación corte de grasa animal.

Objetivo: (40X)

Material: Corte delgado de grasa animal.

Método: Reactivo Sudán IV

Aumento: (40X)

Observaciones: Se puede observar los adipocitos presentes en la muestra de grasa animal.

Reconocimiento de proteínas:

Tabla 2: Reconocimiento de proteínas con el test de Biuret.

Tubo

Test de Biuret

Inicial

Final

1.Albúmina

Normal (blanco transparente)

Positivo (color violeta)

2.Almidón

Normal (blanco transparente)

Negativo (color del reactivo)

Efecto de la temperatura y el cambio de pH:

Tabla 3: Desnaturalización y/o hidrolización de proteínas.

Tubo (muestra)

Albúmina

Estado inicial

Estado final

Reacción con Biuret

B-1 + temperatura

Normal

(transparente blanca)

Positivo, hubo cambio (se diluye con el calor y después, fría vuelve a estar normal)

Positiva (color violeta)

B-2 + Ácido (HNO3)

Normal

(transparente blanca)

Negativo (la solución queda en color amarillo y sufrió cambio de temperatura a causa de la ruptura de enlaces peptídicos)

Negativa (torna una coloración naranja después de un tiempo)

B-2 + Base (NaOH)

Normal

(transparente blanca)

Positivo (se diluye la solución queda transparente).

Positiva (La solución se torna color violeta)

Efecto Saliva y leche

Tabla N°4: presencia de proteínas en saliva y leche.

Tubo (muestra)

Estado incial

Estado final

Saliva + Biuret

Normal (transparente)

Positivo (La solución se torna color violeta por la presencia de la enzima amilasa salival)

Leche + Biuret

Normal (blanco )

Positivo (La solución se torna color morado claro en presencia de la proteína caseína)

Discusión

En el experimento realizado con soluciones de glucosa, sacarosa y almidón, todas ellas al 1% de concentración, al ser sometidas al test de lugol, como se muestra en la tabla 1, solo la muestra de almidón consiguió el morado intenso característico del test positivo, esto se debió a que el lugol, formado por yodo metálico y yoduro potásico, reacciona con el almidón, constituido por dos polisacáridos, amilosa y amilopectina, ya que al introducirse el yodo en la red del polisacárido, siendo específico, en las espiras o hélices del almidón, se produce el color violeta característico de la reacción. “No es por tanto, una verdadera reacción química, sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de esta molécula, apareciendo la coloración azul-violeta” (Arcas, 2013), así en nuestro experimento podemos determinar la presencia de polisacáridos en el almidón, completando el objetivo planteado al inicio del laboratorio. Esta reacción es sensible al calor, ya que, si se aplica temperatura, el color desaparece ya que las espiras del almidón pierden enlaces y con ello su estructura característica y el yodo es liberado. Ahora bien, para explicar el resultado negativo, mostrado también en la tabla 1, de la sacarosa y glucosa basta con entender que el reactivo lugol reconoce a polisacáridos y “la glucosa es el producto final de la hidrólisis del almidón y la celulosa, pudiendo entenderse con ello que se trata de la forma monosacárida de dichos compuestos” (Linstromberg, 1979) no cumpliendo con ello la estructura básica necesaria para que se junten las moléculas de yodo y formen el color oscuro característico del test positivo. Por otra parte, el lugol tampoco reacciona con la sacarosa, pues ésta es un disacárido